活細胞動態(tài)成像系統(tǒng)用于軟組織肉瘤RCC1-Skp2核質轉運的調控研究

軟組織肉瘤（soft-tissue sarcoma ，STS），是一種高發(fā)在結締組織的惡性腫瘤，遺傳異質性復雜、隱匿性強、局部復發(fā)率高、轉移率高，多采用放化療結合特定靶點和生物標志物的靶向治療改善其預后和療效。

軟組織肉瘤腫瘤生物學的關鍵特征之一是細胞周期S期的無序提前。S期激酶相關蛋白-2（Skp2）是S期提前的關鍵調節(jié)因子，其高表達與軟組織肉瘤的預后較差有關。

已有研究發(fā)現(xiàn)， Skp2蛋白的穩(wěn)定性和活性與腫瘤的發(fā)展有關。Skp2在細胞內部的轉運過程決定其亞細胞定位和功能開啟，但目前負責Skp2核質轉運的蛋白質尚未明確。染色體凝聚調節(jié)蛋白1（RCC1）在調控細胞有絲分裂和蛋白質核質轉運方面扮演著關鍵角色，其高表達與腫瘤細胞周期進展的提前和增殖能力的提升正相關，但它是否參與調節(jié)Skp2的核質轉運，以及這一過程如何影響軟組織肉瘤的發(fā)展仍有待研究。

 

福州大學的呂鵬、盧鐘磊等人通過敲低（knockdown）RCC1的方法對RCC1與Skp2的關系，及其在軟組織肉瘤細胞周期和進展中的功能進行研究，成果以“Targeting RCC1 to block the human soft-tissue sarcoma by disrupting nucleo-cytoplasmic trafficking of Skp2”為題，于2024年4月發(fā)表在《Cell Death and Disease》雜志上。

研究發(fā)現(xiàn)， Skp2是RCC1在STS中的下游靶標，RCC1 可以直接與 Skp2 結合，并可能作為STS 細胞中Skp2 核胞質轉運的貨物蛋白。通過誘導Skp2的細胞質滯留和穩(wěn)定，以促進STS細胞的細胞周期轉變和增殖。RCC1的敲低顯著抑制了STS細胞的周期進展、增殖和遷移，抑制體內STS的生長，從而在STS中發(fā)揮抑癌作用。同時，靶向抑制RCC1可以恢復對免疫療法和化療的敏感性。因此，RCC1可能是改善臨床STS治療的一個有希望的靶點，可能具有與一線抗癌藥物聯(lián)合治療的潛力。

 

本研究采用德國innoME公司的zenCELL owl活細胞動態(tài)成像及分析系統(tǒng)，動態(tài)監(jiān)測SW872和 HTC75兩種STS細胞系在RCC1敲低后的增殖變化過程（圖1和圖2）。

 

圖2 HTC75細胞在RCC1敲低后的生長狀態(tài)
 

德國InnoME公司自主研發(fā)和生產的zenCELL owl活細胞動態(tài)成像及分析系統(tǒng)，基于非標記、非侵入方法，原位記錄細胞實時生長和定量的分析數(shù)據。zenCELL owl體積小巧，耐溫耐濕，可在細胞培養(yǎng)箱內長時間連續(xù)工作；通過24個顯微成像鏡頭，對24個視野進行連續(xù)的動態(tài)監(jiān)測和圖像獲取。zenCELL owl為用戶提供高質量圖像、視頻、統(tǒng)計學曲線和定量數(shù)據，實現(xiàn)細胞增殖／增殖抑制、細胞培養(yǎng)質控／培養(yǎng)優(yōu)化、遷移／侵襲等諸多活細胞動態(tài)過程的監(jiān)測。

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https://doi.org/10.1038/s41419-024-06629-2

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