為何選用時間分辨熒光檢測

為何選用時間分辨熒光檢測：

我們知道，以常用熒光素作為標記物的熒光免疫測定往往受本底熒光的干擾影響，例如包括樣本載體、血清成分、儀器激發(fā)光源的雜射光的干擾，使得靈敏度受到很大限制。時間分辨熒光免疫測定（timeresolvedfluorescenceimmunoassay，TR-FIA）是針對這缺點加以改進的一種新型檢測技術(shù)。

時間分辨熒光免疫測定的基本原理是以鑭系元素銪（Eu）螯合物作熒光標記物，利用這類熒光物質(zhì)有長熒光壽命的特點，延長熒光測量時間，待短壽命的自然本底熒光完全衰退后再行測定，所得信號完全為長壽命鑭系螯合物的熒光，從而有效地消除非特異性本底熒光的干擾。

我公司的HG-1000時間分辨免疫熒光分析儀用的就是該技術(shù)。

時間分辨熒光免疫測定使用的儀器:

時間分辨熒光免疫測定所用檢測儀器為時間分辨熒光分析儀，與一般的熒光分光光度分析儀不同，主要采用脈沖光源，照射樣品后即短暫熄滅，以電子設(shè)備控制延緩時間，待非特異本底熒光衰退后，再測定樣品發(fā)出的長鑭系熒光。檢測靈敏度可達0.2～1ng/ml。

試劑上：除了將試劑抗原或試劑抗體用鑭系元素銪（Eu）螯合物進行標記，試劑與標本中相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng)，還利用了增強液使熒光信號增強，因為免疫反應(yīng)完成后，生成的抗原－抗體－銪標記物復(fù)合物在弱堿性溶液中，經(jīng)激發(fā)后所產(chǎn)生的熒光信號甚弱。在增強液中可至pH2～3，銪離子很容易解離出來，并與增強液中的β-二酮體生成帶有強烈熒光的新的銪螯合物，大大有利于熒光測量。