測定細菌的大小實驗操作步驟

測定細菌的大小實驗操作步驟

1．測微尺的構(gòu)造 顯微鏡測微尺是由目鏡測微尺和鏡臺接物測微尺組成，目鏡測微尺是一塊圓形玻璃片，其中有精確的等分刻度，在5mm刻尺上分50份(圖14一lC)。目鏡測微尺每格實際代表的長度隨使用接目鏡和接物鏡的放大倍數(shù)而改變，因此在使用前必須用鏡臺測微尺進行標定。
鏡臺測微尺為一專用中央有精確等分線的載玻片(圖14—1A)，一般將長為1mm的直線等分成100個小格，每格長0.0lmm即10μm，是專用于校正目鏡測微尺每格長度的。

2．目鏡測微尺的標定 把目鏡的上透鏡旋開，將目鏡測微尺輕輕放在目鏡的隔板上，使有刻度的一面朝下。將鏡臺測微尺放在顯微鏡的載物臺上，使有刻度的一面朝上。先用低倍鏡觀察，調(diào)焦距，待看清鏡臺測微尺的刻度后，轉(zhuǎn)動目鏡，使目鏡測微尺的刻度與鏡臺測微尺的刻度相平行，并使兩尺左邊的一條線重合，向右尋找另外一條兩尺相重合的直線(圖15—lB)。

3．計算方法
標定公式：目鏡測微尺每格長度（μm）=兩條重合線間鏡臺測微尺的格數(shù)×10÷兩條重合線間目鏡測微尺的格數(shù)
例如，目鏡測微尺20個小格等于鏡臺測微尺3小格，已知鏡臺測微尺每格為10μm，則3小格的長度為3×10=30μm，那么相應(yīng)地在目鏡測微尺上每小格長度為3×10÷20=1.5μm。用以上計算方法分別校正低倍鏡、高倍鏡及油鏡下目鏡測微尺每格實際長度。

4．菌體大小的測定 將鏡臺測微尺取下，分別換上大腸桿菌及金黃色葡萄球菌玻片標本，先在低倍鏡和高倍鏡下找到目的物，然后在油鏡下用目鏡測微尺測量菌體的大小。先量出菌體的長和寬占目鏡測微尺的格數(shù)，再以目鏡測微尺每格的長度計算出菌體的長和寬。并詳細記錄于表15—1中。
例如，目鏡測微尺在這架顯微鏡下，每格相當于1.5μm，測量的結(jié)果，若菌體的平均長度相當于目鏡測微尺的2格，則菌體長應(yīng)為3×1.5μm=3.0μm。
一般測量菌體的大小，應(yīng)測定10～20個菌體，求出平均值，才能代表該菌的大小。