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WMicrotracker ARENA系統(tǒng)助力秀麗隱桿線蟲熱休克應(yīng)激研究

瀏覽次數(shù):274 發(fā)布日期:2025-3-11  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負

生物體暴露在不同的溫度條件下會導(dǎo)致細胞功能的改變和負責(zé)減輕細胞損傷的基因的表達。熱休克應(yīng)激反應(yīng)機制在細菌、植物和動物中是保守的,包括所謂的熱休克蛋白的表達。

秀麗隱桿線蟲已經(jīng)成為研究生理和細胞對熱應(yīng)激反應(yīng)及其與病理和衰老關(guān)系的一個非常有用的模型。使用WMicrotracker ARENA系統(tǒng),可以實時研究對壓力的行為反應(yīng)動力學(xué),并測量新的小分子、基因或天然化合物的效果。這里有一個測量的例子…

熱應(yīng)力下行為變化的動力學(xué):

在本實驗中,我們可以觀察到蟲群在溫度脅迫下的行為動態(tài)效應(yīng),在L3幼蟲和3齡成蟲中可觀察到不同的反應(yīng)。


方法:

(1)在20°C的NGM + OP50中獲得同步蟲群。(2)用緩沖液從培養(yǎng)皿中收集蠕蟲。(3)在10ul體積內(nèi)數(shù)蠕蟲數(shù),調(diào)整體積,使其濃度為50蠕蟲/ 20ul;(4) 按每孔20μl蟲液轉(zhuǎn)移至含無菌NGM的6孔微孔板。(5)使用WMicrotracker ARENA記錄有蟲板的活動,溫度設(shè)置為:22℃時30m, 37℃時90m, 22℃時360m。(6)使用MSExcel生成數(shù)據(jù)報告和繪圖。

圖片

WMicrotracker小動物活動力分析系統(tǒng),為測試培養(yǎng)于液體中的小模式動物而優(yōu)化設(shè)計,在24、48、96或384孔板中自動量化小模式動物的行為活動。已成功證明了可應(yīng)用于例如線蟲(C.elegans)、斑馬魚幼蟲(Zebrafish larvae)和其它昆蟲幼蟲(insects larvae),應(yīng)用于化合物篩選、RNAi/嗎=啉試驗、轉(zhuǎn)基因試驗、長周期測試或自定義實驗;毒性測試、麻痹試驗、代謝試驗、疾病模型、突觸調(diào)節(jié)器、抗逆性、健康期(衰老)、趨化性、卵孵化等實驗。
 

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