生物制品可比性研究的意義、研究內容和研究結果

在生物制品的開發(fā)過程和獲得批準后，生產(chǎn)工藝的變更是不可避免的。變更的原因包括改進生產(chǎn)工藝、增加規(guī)模、提高產(chǎn)品穩(wěn)定性，以及根據(jù)法規(guī)要求進行變更。

當生產(chǎn)工藝發(fā)生變更時，產(chǎn)品的質量、安全性和有效性都有可能受到影響，這就需要生產(chǎn)商總體評估產(chǎn)品的有關質量特性，以證明該變更沒有對原液及制劑的安全性和有效性產(chǎn)生不利影響，從而成功得到監(jiān)管機構的認同與批準。

可比性研究是生物制品藥學變更評價的基礎和成功的關鍵。為了使企業(yè)在管理工藝變更時能夠得到更好的指導，包括與監(jiān)管機構更有效地溝通等，全世界的藥品監(jiān)管機構頒布了幾個不同的法規(guī)指南，包括：

● ICH: Q5E: Comparability of Biotechnological/Biological Products Subject to Changes in their Manufacturing Process

● FDA: Comparability Protocols for Post-approval Changes to the Chemistry, Manufacturing, and Controls Information in an NDA, ANDA, or BLA

● EMA: Guideline on Comparability of Biotechnology-derived Medicinal Products after a Change in the Manufacturing Process

國家食品藥品監(jiān)管總局發(fā)布《生物類似藥研發(fā)與評價技術指導原則》，對可比性研究的開展也具有十分重要的指導意義。

變更的目的是通過收集和評估相關數(shù)據(jù)，確定生產(chǎn)工藝的變更是否對產(chǎn)品產(chǎn)生任何不良的影響，確保生產(chǎn)工藝變更后產(chǎn)品的質量、安全和有效性。

而可比性研究則是通過評估可能影響產(chǎn)品安全性和有效性的質量之間的差異，來確定使用變更前產(chǎn)品進行的非臨床研究和臨床研究是否與變更后的產(chǎn)品依然相關的研究。理想情況下，可以確認變更前后產(chǎn)品質量具有可比性，但是如果無法證明，或者在可比性研究中發(fā)現(xiàn)影響產(chǎn)品安全性和有效性的重大差異，則需要額外的非臨床或/和臨床橋接實驗以證明可比性。

具有可比性，并不意味著變更前和變更后的產(chǎn)品的質量特性一定要相同，但產(chǎn)品的安全性、鑒定、純度和活性等應高度相似，并且能以現(xiàn)有知識充分預測，以確保質量特性上的任何差別對藥物制劑的安全性或有效性不會產(chǎn)生不利影響。

工藝變更的類型涉及從微小變更到重大變更。對于微小變更，不能獲得可比性產(chǎn)品的風險很低；而重大變更也有不能獲得具有可比性產(chǎn)品的風險。為了確定是否需要進行可比性研究，如果需要，在確定可比性研究的深入程度上，一般會采用ICH Q9中所概述的風險評估程序進行評估。

風險評估有助于確定可比性的研究范圍、協(xié)助批次選擇、分析方法以及需要進行哪些研究（如擴展表征、強制降解等）。風險評估應該側重于產(chǎn)品及其特性，Table 1中列出了一些可比性風險及其研究內容的要求。

Table 1.可比性風險及研究內容

批次的選擇

在決定可比性研究包含的批次數(shù)量時，需要考慮產(chǎn)品開發(fā)階段、變更類型以及對工藝和產(chǎn)品的理解。盡管使用多個批次可以證明過程的穩(wěn)健，但它可能不可行或沒有必要，尤其是對于處于開發(fā)階段的項目。

可比性研究的樣品在指導文件中對研究批次的描述并不清晰。FDA建議比較平行檢測多個單獨的產(chǎn)品批次；而ICH Q5E則規(guī)定對于已上市的產(chǎn)品，應對恰當批次進行變更后產(chǎn)品的分析，以證明工藝的一致性。

對于重大變更，一般選擇變更后≥3批連續(xù)的商業(yè)化規(guī)模的樣品；而中等變更則選擇變更后3批連續(xù)的商業(yè)化規(guī)模的樣品。微小變更可以用較少的變更后批次進行研究，一般選擇≥1批連續(xù)的商業(yè)化規(guī)模樣品。

如果要減少可比性研究的批次（采用括號法、矩陣法）等或者縮小研究規(guī)模（擴大規(guī)模的變更除外），應在科學和風險評估的基礎上，提供充分的依據(jù)。

可接受標準

應制定前瞻性的可接受標準�？杀刃匝芯康目山邮軜藴什坏扔谫|量標準。可接受標準要根據(jù)工藝和產(chǎn)品質量的歷史數(shù)據(jù)設定，排除任何數(shù)據(jù)都應有充分的理由。設定的可接受標準不能低于質量標準，除非證明是合理的。根據(jù)研究方法的性質，可比性研究驗收標準可分為定量標準和定性標準，定量標準要滿足范圍要求，定性標準則看圖譜比較。

評估變更后產(chǎn)品的可接受標準時，考慮ICH Q6B中關于質量標準設定的基本原則，如變更對已驗證的生產(chǎn)工藝、特性鑒定研究結果、批分析數(shù)據(jù)、穩(wěn)定性數(shù)據(jù)、非臨床和臨床經(jīng)驗的影響。

可比性研究可接受標準的制定可以參考Table 2。

Table 2.可比性研究可接受標準制定參考表

工藝性能的比較

工藝可比性研究主要是證明工藝的穩(wěn)健性和批間的一致性，使變更前后工藝和中間產(chǎn)物具有可比性，且變更后的工藝控制能力不低于變更前。

進行工藝評估應考慮諸多因素，如工藝步驟、工藝參數(shù)、過程控制結果與歷史數(shù)據(jù)的比較，以及額外工藝過程控制參數(shù)的比較（必要時）等。如果可證明單一變更對后續(xù)工藝及產(chǎn)物無影響，驗證可以限制在被影響的工藝步驟內進行；如果對后續(xù)產(chǎn)生影響，應同時對后續(xù)步驟進行驗證。

應關注變更前后生產(chǎn)工藝對有關物質、雜質和外源因子的去除能力的可比性，必要時，應開展病毒去除／滅活效果驗證，開展中間品保存研究，過濾膜和層析柱使用壽命研究，以及開展一次性使用產(chǎn)品的可提取物及可浸出物對產(chǎn)品質量的影響驗證等。

質量的比較

用于可比性研究的質量對比數(shù)據(jù)通常來自常規(guī)批次放行檢測和擴展表征，將變更后的產(chǎn)品質量與歷史數(shù)據(jù)進行比較。當原液的變更影響到制劑時，應同時展開原液和制劑質量的可比性研究。

Table 3中列出了常用的單抗原液放行檢測項目。

Table 3.常用單抗原液放行檢測項目

除了常規(guī)的放行檢測之外，擴展表征分析測試也會進行，以便能夠更全面地檢測產(chǎn)品的變化對安全性和有效性的影響，或者獲得對變更后產(chǎn)品發(fā)生的分子結構變化的更細節(jié)的評估。

常用的擴展表征分析方法主要用于分析產(chǎn)品的初級結構、二級結構和更高級的結構，電荷異構體、糖基化、氧化和純度。由于這些分析方法要比常規(guī)用于產(chǎn)品檢測放行的方法更復雜，且沒有足夠的歷史數(shù)據(jù)用于變更前后產(chǎn)品的對比分析，因此通常采用頭對頭的對比分析。

穩(wěn)定性的比較

穩(wěn)定性研究能夠檢測出那些通過結構確證研究不能檢測到的細微差異。同樣地，當原液的變更影響到制劑時，應同時展開原液和制劑的穩(wěn)定性研究。穩(wěn)定性方案應當包括加速條件和實時條件下的穩(wěn)定性研究，如果可以，還需要包括強制降解研究。

ICH Q5E強調“必要的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，包括加速或強制降解條件下的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，以更深刻理解產(chǎn)品降解途徑上的潛在差異，以及由此導致的產(chǎn)品相關物質和產(chǎn)品相關雜質的潛在差異”。

加速，尤其是強制降解穩(wěn)定性研究，通過產(chǎn)生相對較高的降解水平，可以在短時間內對變更前后的批次進行頭對頭的比較，能夠更好地建立產(chǎn)品降解趨勢，比較降解產(chǎn)物及降解動力學。

早期進行的可比性研究可能不需要強制降解研究。

可比性橋接研究

產(chǎn)品可比性的確定以質量特性研究為基礎，當質量數(shù)據(jù)對確定可比性不充分時，可以適當?shù)卦黾臃桥R床和臨床研究以獲得補充證據(jù)。

ICH Q5E中涉及的非臨床和臨床研究包含藥代動力學（PK）研究、藥效動力學（PD）研究、臨床有效性研究、特異的安全性研究、免疫原性研究和藥物警戒研究等。

非臨床和臨床研究的范圍和類型要基于不同因素進行具體問題具體分析。主要考慮的因素有以下三點：一是質量研究結果，如新雜質可能需要進一步的毒理學研究。二是對產(chǎn)品的認知水平，包括產(chǎn)品質量屬性與安全性及有效性的關系，產(chǎn)品作用方式和作用位點等。三是產(chǎn)品現(xiàn)有的非臨床和臨床數(shù)據(jù)，如長期給藥比短期給藥對某種差異可能帶來的風險會更高；皮下注射比靜脈注射通常更易引起免疫原性等。

（1）基于產(chǎn)品質量特性研究的數(shù)據(jù)滿足預定義的可接受標準，這種情況不需要再進行額外的研究。

（2）變更前后的產(chǎn)品質量特性研究數(shù)據(jù)有差異，如果生產(chǎn)商能夠基于對分子的理解和科學知識，可以證明該差異對安全性和有效性沒有不利影響，則即使變更前后的質量屬性超出預定義的可接受標準，也可能不需要再進行額外的研究。

（3）僅基于質量數(shù)據(jù)的評估無法建立可比性，則需要進一步進行非臨床或/和臨床研究證明變更前后的可比性。

（4）如果所有的研究數(shù)據(jù)都無法證明變更前后產(chǎn)品的可比性，則要么將變更后的產(chǎn)品作為一個新的產(chǎn)品進行開發(fā)，要么不再選擇執(zhí)行變更后的工藝。
 

參考文獻

[1] ICH Q5E Comparability of Biotechnological/Biological Products Subject to Changes in their Manufacturing Process

[2] FDA Comparability Protocols for Post-approval Changes to the Chemistry, Manufacturing, and Controls Information in an NDA, ANDA, or BLA

[3] EMA Guideline on Comparability of Biotechnology-derived Medicinal Products after a Change in the Manufacturing Process

[4] The Development of Therapeutic Monoclonal Antibody Products: A Comprehensive Guide to CMC Activities from Clone to Clinic

[5] NMPA《已上市生物制品藥學變更研究技術指導原則（試行）》

[6] NMPA《臨床試驗期間生物制品藥學研究和變更技術指導原則（試行）》

[7] NMPA《預防用疫苗臨床可比性研究技術指導原則》