熒光光度計(jì)與超微量分光光度計(jì)用途比較

熒光光度計(jì)與超微量分光光度計(jì)兩者均可實(shí)現(xiàn)對(duì)DNA、RNA以及蛋白質(zhì)濃度的定量，但他們之間有什么區(qū)別呢？
一、技術(shù)原理對(duì)比

1. ​熒光計(jì)

• 原理：基于熒光染料與靶分子（如DNA、RNA、蛋白質(zhì)）特異性結(jié)合的原理，通過激發(fā)光激發(fā)熒光信號(hào)并檢測其強(qiáng)度來定量。
• 優(yōu)勢(shì)：
  • 靈敏度高（最低檢測0.1 pg/μl），線性范圍廣（如dsDNA檢測范圍0.2–100 ng）。
  • 特異性強(qiáng)，避免傳統(tǒng)紫外法受雜質(zhì)（如酚類、鹽離子）干擾的問題。

2. ​超微量分光光度計(jì)

• ​原理：基于朗伯-比爾定律，通過測量樣品在260 nm（DNA/RNA）、280 nm（蛋白質(zhì)）等波長處的吸光度計(jì)算濃度。
• ​優(yōu)勢(shì)：
  • 樣品用量極少（最低0.3 μl），支持全波長掃描（如UV-Vis檢測）。
  • 操作簡單，無需額外試劑，可同時(shí)檢測核酸純度（A260 /A280，A260 /A230）。

二、應(yīng)用場景差異

技術(shù)類型	典型應(yīng)用	適用場景
熒光計(jì)	NGS文庫構(gòu)建前定量、稀有樣本（如microRNA）檢測、轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)前定量	需高精度、低樣本消耗的場景，尤其是下游實(shí)驗(yàn)成本高或周期長的研究。
超微量分光光度計(jì)	常規(guī)核酸/蛋白質(zhì)定量、菌液密度檢測、污染物分析（如糖類、苯酚）	需快速篩查樣品濃度或純度的常規(guī)實(shí)驗(yàn)，支持多波長掃描（如UV-Vis、熒光）。

 
三、性能參數(shù)對(duì)比

指標(biāo)	熒光計(jì)	超微量分光光度計(jì)
靈敏度	0.01ng/μl（DNA）	0.5 μl樣品量，檢測上限可達(dá)37500 ng/μl（dsDNA）
線性范圍	0.2–100 ng（dsDNA）	0.75–37500 ng/μl（dsDNA）
雜質(zhì)干擾	特異性染料避免干擾	需通過A260 /A280，A260 /A230比值評(píng)估純度

四、選擇建議

• ​優(yōu)先選熒光計(jì)（達(dá)遠(yuǎn)辰光熒光計(jì)）：當(dāng)樣本珍貴（如單細(xì)胞測序）、需高靈敏度或下游實(shí)驗(yàn)成本高時(shí)。
• ​優(yōu)先選超微量分光光度計(jì)：常規(guī)核酸/蛋白定量、快速篩查或需多波長檢測時(shí)。