依據(jù)藥品微生物實(shí)驗(yàn)室管理指導(dǎo)原則解析菌種管理五大核心風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)

依據(jù)2025年版《中國(guó)藥典·9203藥品微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理指導(dǎo)原則》，工作菌株的傳代次數(shù)不得超過(guò)5代（從標(biāo)準(zhǔn)菌株第0代開(kāi)始計(jì)算），這一規(guī)定被視為實(shí)驗(yàn)室菌種管理的“紅線”。本文結(jié)合權(quán)威規(guī)范，解析菌種管理的五大核心風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)。

一、試驗(yàn)菌來(lái)源紅線：清晰可溯是根本
藥品微生物檢驗(yàn)所采用的試驗(yàn)菌，必須為來(lái)源清晰的標(biāo)準(zhǔn)菌株，或者是選用與標(biāo)準(zhǔn)菌株所有相關(guān)特性等效且具備可溯源性的商業(yè)派生菌株。標(biāo)準(zhǔn)菌株應(yīng)源自獲得認(rèn)可的國(guó)內(nèi)或國(guó)外菌種保藏機(jī)構(gòu)，諸如CMCC（中國(guó)醫(yī)學(xué)細(xì)菌保藏管理中心）、ATCC（美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心）、NCTC（英國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心）等。從這些機(jī)構(gòu)獲取的標(biāo)準(zhǔn)菌株，在復(fù)蘇、復(fù)壯或進(jìn)行培養(yǎng)物制備時(shí)，務(wù)必嚴(yán)格依照供應(yīng)商提供的說(shuō)明，或者按照已經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的方法謹(jǐn)慎操作。

商業(yè)派生菌株由標(biāo)準(zhǔn)菌株派生而來(lái)，具有可溯源性，分為定性與定量?jī)煞N類型，這類商業(yè)派生菌株應(yīng)僅用作工作菌株。采購(gòu)時(shí)必須嚴(yán)格審核供應(yīng)商資質(zhì)。

科德角國(guó)際專業(yè)提供商業(yè)派生菌株，其菌株均遵循嚴(yán)格的ISO9001認(rèn)證流程進(jìn)行生產(chǎn)，并獲得ISO17034和ISO/IEC17025國(guó)際認(rèn)證。每一批次的菌種產(chǎn)品均附有分析證書(shū)（Certificate of Analysis, COA），以保證其有效性和可追溯性。

倘若使用來(lái)源不明的菌種，其特性難以確定，可能攜帶未知雜質(zhì)或發(fā)生變異，這會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生極大干擾，使整個(gè)實(shí)驗(yàn)失去意義。

二、菌株分類定義紅線：嚴(yán)格區(qū)分不容混淆
1. 標(biāo)準(zhǔn)菌株：指直接從國(guó)內(nèi)或國(guó)外專業(yè)菌種保藏機(jī)構(gòu)獲取的，至少能定義到屬或種水平的菌株。例如銅綠假單胞菌[CMCC (B)10 104]，其中(B)代表細(xì)菌；白色念珠菌[CMCC (F)98 001]，(F)代表真菌。

2. 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株：從國(guó)內(nèi)或國(guó)外菌種保藏機(jī)構(gòu)獲得的標(biāo)準(zhǔn)菌株經(jīng)過(guò)復(fù)活并在適宜的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)后，即為標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株。標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株應(yīng)進(jìn)行純度和特性確認(rèn)。

3. 儲(chǔ)備菌株：由標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株轉(zhuǎn)接一代所獲的培養(yǎng)物，同樣需要對(duì)其純度和特性加以確認(rèn)。

4. 工作菌株：通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株、儲(chǔ)備菌株或標(biāo)準(zhǔn)菌株轉(zhuǎn)接一代而得的培養(yǎng)物。工作菌株不宜再進(jìn)行傳代，也不可替代標(biāo)準(zhǔn)菌株和標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株。

明確各菌株的定義和界限，是保障菌種管理有序開(kāi)展的關(guān)鍵。一旦混淆，整個(gè)試驗(yàn)體系將陷入混亂。

三、采購(gòu)接收流程紅線：規(guī)范操作保障質(zhì)量
（一）采購(gòu)：正規(guī)途徑是保障
應(yīng)從認(rèn)可的國(guó)內(nèi)或國(guó)外菌種保藏機(jī)構(gòu)、合資格的商業(yè)派生菌株生產(chǎn)廠家等認(rèn)可途徑采購(gòu)菌種。

（二）接收：細(xì)致核對(duì)與妥善處理
1. 首要步驟是確認(rèn)所接收的菌種是否契合預(yù)期使用要求，同時(shí)收集菌株的產(chǎn)品供應(yīng)單、菌種證明、說(shuō)明書(shū)等相關(guān)資料，驗(yàn)收完畢后進(jìn)行歸檔保存。這些資料是菌種的“身份證”和“使用指南”，不可或缺。

2.詳細(xì)記錄所有關(guān)于菌株的資料，確保信息完整準(zhǔn)確。

3. 嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)要求保藏菌種，并在有效期內(nèi)使用，否則菌種的活性和特性可能受到影響。

（三）接收記錄：詳實(shí)記錄便于追溯
需詳細(xì)記錄接收菌種的各項(xiàng)信息，包括菌株名稱、編號(hào)代碼（如CMCC、ATCC）、供應(yīng)商/生產(chǎn)商名稱、批號(hào)或生產(chǎn)日期、有效期、接收日期、接收數(shù)量。對(duì)于商業(yè)派生菌株，還應(yīng)記錄菌種代數(shù)，同時(shí)注明接收人。完整準(zhǔn)確的接收記錄，是菌種管理全程追溯的起點(diǎn)。

四、傳代操作紅線：次數(shù)與規(guī)范雙重把控
傳代指將活的微生物接種到新鮮培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以獲取新的微生物培養(yǎng)物的操作。新培養(yǎng)物相對(duì)原接種微生物即為新一代。所有菌種都必須定期傳代，同時(shí)對(duì)純度、特性等實(shí)驗(yàn)室所需關(guān)鍵指標(biāo)進(jìn)行確認(rèn)。應(yīng)指定專人負(fù)責(zé)定期傳代工作，每次傳代時(shí)嚴(yán)格核對(duì)，謹(jǐn)防出現(xiàn)混淆。尤其要嚴(yán)格控制菌株傳代次數(shù)，從菌種保藏機(jī)構(gòu)獲得的標(biāo)準(zhǔn)菌株記為第0代，傳代不得超過(guò)5代。過(guò)度傳代極易引發(fā)菌種變異風(fēng)險(xiǎn)增加，導(dǎo)致菌種失去原有的特性，無(wú)法滿足試驗(yàn)需求，這也是傳代超5代可能直接報(bào)廢的原因。

（一）傳代記錄：完整記錄過(guò)程細(xì)節(jié)
從標(biāo)準(zhǔn)菌株到工作菌株的傳代記錄，需涵蓋菌株名稱、編號(hào)、傳代日期、傳代數(shù)、培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度、菌落形態(tài)、確認(rèn)實(shí)驗(yàn)、傳代人簽名等內(nèi)容。此外，還應(yīng)記錄菌株儲(chǔ)存位置和條件，以及傳代后上一次菌株的處理記錄，比如高壓滅菌清洗記錄等。全面的傳代記錄，能清晰呈現(xiàn)菌種的“成長(zhǎng)軌跡”，為試驗(yàn)提供重要參考。