還在為Western blot轉(zhuǎn)膜效率頭疼?不同樣本、不同蛋白總翻車?一篇干貨帶你解鎖三大轉(zhuǎn)膜技術(shù)的關(guān)鍵差異,實(shí)驗(yàn)效率翻倍不是夢(mèng)!
三大轉(zhuǎn)膜法"比武擂臺(tái)"
01 傳統(tǒng)濕轉(zhuǎn)法:經(jīng)典中的"老司機(jī)"
☑️ 適用場(chǎng)景:>100kDa大分子量蛋白、膜蛋白
☑️ 核心優(yōu)勢(shì):低溫環(huán)境減少蛋白降解,均一性好
⚠️ 硬傷:耗時(shí)2小時(shí)+,緩沖液用量大(費(fèi)錢警告。
💡 操作口訣:冰浴降溫要徹底,濾紙浸潤(rùn)排氣泡
02 半干轉(zhuǎn)法:省時(shí)省料的"效率派"
☑️ 適用場(chǎng)景:10-100kDa常規(guī)蛋白
☑️ 核心優(yōu)勢(shì):15-60分鐘閃電戰(zhàn),緩沖液僅需5-10ml
⚠️ 硬傷:易發(fā)熱需嚴(yán)格控壓,大分子易截留
💡 操作秘籍:濾紙裁剪精確到毫米,電壓梯度要優(yōu)化
03 快速濕轉(zhuǎn)法:新晉"六邊形戰(zhàn)士"
☑️ 適用場(chǎng)景:10-200kDa蛋白都適用
☑️ 核心優(yōu)勢(shì):20分鐘極速轉(zhuǎn)膜
⚠️ 硬傷:暫無
💡 黑科技加持:自帶制冷卻系統(tǒng)+增強(qiáng)型電極
艾普拜生物CycleBlot快速濕轉(zhuǎn)儀
20分鐘快速濕轉(zhuǎn),完美融合傳統(tǒng)濕轉(zhuǎn)和半干轉(zhuǎn)的優(yōu)勢(shì),既擁有濕轉(zhuǎn)法的穩(wěn)定,又享受半干轉(zhuǎn)的速度,一招解決轉(zhuǎn)印痛點(diǎn)!
進(jìn)階實(shí)驗(yàn)錦囊
通用避坑指南
- 甲醇激活PVDF膜別超15秒!
- 見氣泡如見仇敵——玻璃棒滾壓大法
- 轉(zhuǎn)膜后立即標(biāo)記膜角落(防結(jié)果混淆)
特殊樣本處理
- 磷酸化蛋白:全程4℃操作+添加磷酸酶抑制劑
- 膜蛋白:緩沖液加0.1% SDS助攻
艾普拜生物WB產(chǎn)品線一站式解決方案