串聯(lián)染料(Tandem Dyes)的原理、優(yōu)勢及應(yīng)用
瀏覽次數(shù):110 發(fā)布日期:2025-4-1
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串聯(lián)染料(Tandem Dyes)通過將兩種熒光分子結(jié)合,利用熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)機(jī)制實現(xiàn)高效的能量傳遞和熒光發(fā)射。這類染料在生物醫(yī)學(xué)研究中具有重要應(yīng)用,尤其是在多色流式細(xì)胞術(shù)、熒光顯微鏡和活體成像等領(lǐng)域。
串聯(lián)染料的原理
串聯(lián)染料的核心原理是熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)。其結(jié)構(gòu)包括兩個部分:供體分子--吸收激發(fā)光并傳遞能量;受體分子--接收能量并發(fā)射熒光。當(dāng)供體分子吸收特定波長的光后,通過熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)給受體分子,最終由受體分子發(fā)射更長波長的熒光。
常見的串聯(lián)染料包括 PE-Cy5、APC-Cy7、PerCP-Cy5.5 等,百螢生物都有供應(yīng)。
AAT Bioquest串聯(lián)染料的優(yōu)勢
高亮度:供體分子通常具有高摩爾消光系數(shù),使串聯(lián)染料的信號強(qiáng)度顯著增強(qiáng)。
寬光譜覆蓋:通過組合不同的供體和受體,串聯(lián)染料可以覆蓋從可見光到近紅外的廣泛光譜范圍。
多色檢測能力:適用于多參數(shù)實驗,如多色流式細(xì)胞術(shù),可同時檢測多個靶標(biāo)。
靈活性:可根據(jù)實驗需求選擇不同的供體和受體組合。
常見的串聯(lián)染料及其特性:
染料名稱 |
供體分子 |
受體分子 |
激發(fā)波長(nm) |
發(fā)射波長(nm) |
應(yīng)用領(lǐng)域 |
PE-Cy7 |
PE |
Cy7 |
565 |
778 |
多色流式細(xì)胞術(shù)、活體成像 |
APC-Cy7 |
APC |
Cy7 |
651 |
779 |
多色流式細(xì)胞術(shù) |
PE-Cy5 |
PE |
Cy5 |
565 |
666 |
多色流式細(xì)胞術(shù) |
PerCP-Cy5.5 |
PerCP |
Cy5.5 |
482 |
695 |
多色流式細(xì)胞術(shù) |
AAT Bioquest串聯(lián)染料的應(yīng)用
多色流式細(xì)胞術(shù)(FACS)
串聯(lián)染料(如
PE-Cy7、
APC-Cy7)可用于多色流式細(xì)胞分析,實現(xiàn)對細(xì)胞表面標(biāo)志物和細(xì)胞內(nèi)分子的高靈敏度檢測。
全血流式細(xì)胞術(shù)分析:使用PE-Cy7標(biāo)記的抗人CD4
SK3偶聯(lián)抗體染色,通過Aurora光譜流式細(xì)胞儀的PE-Cy7特異性B14-A通道監(jiān)測熒光信號。
免疫熒光染色
串聯(lián)染料與抗體偶聯(lián)后,可用于組織切片或細(xì)胞樣本的多色熒光染色,廣泛應(yīng)用于病理學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究。
活體成像
串聯(lián)染料(如
Cy5.5、
Cy7)具有近紅外熒光特性,適用于小動物活體成像,用于腫瘤檢測、藥物篩選等研究。
多重檢測
串聯(lián)染料的多色熒光特性使其成為多重檢測的理想工具,可同時檢測多個目標(biāo)分子,提高實驗效率。
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擴(kuò)展多色檢測能力
串聯(lián)染料能夠在單一激發(fā)波長下實現(xiàn)多重發(fā)射,顯著擴(kuò)展了多色熒光檢測的參數(shù)數(shù)量。
提高實驗效率
通過減少光譜重疊,優(yōu)化信號強(qiáng)度,串聯(lián)染料能夠提高實驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性。
節(jié)省成本
使用串聯(lián)染料可以減少對多激光流式細(xì)胞儀的依賴,降低實驗成本。
推動科研創(chuàng)新
串聯(lián)染料為多色熒光檢測提供了新的可能性,推動了生物醫(yī)學(xué)研究的創(chuàng)新和發(fā)展。