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qEV尺寸排阻外泌體分離柱
產(chǎn)品詳情

qEV尺寸排阻分離柱是由新西蘭IZON公司研發(fā)和生產(chǎn)的一種基于尺寸排阻色譜法(Size Exclusion Chromatography, SEC)原理的外泌體分離-純化技術(shù)。該技術(shù)具有簡便、快速、容易標準化操作的特點,只需要15min就可以從多種類型樣本中提取到完整的高純度外泌體。相較于其他方法,qEV所提取的外泌體純度更高、濃度更高、活性也更高,還可以重復(fù)使用。qEV分離的外泌體尤其適用于外泌體蛋白組和外泌體功能實驗。
IZON公司qEV尺寸排阻外泌體分離柱提供兩種分離范圍。常用的 70 nm qEV 色譜柱對 70 nm 至 1000 nm 的顆粒具有最佳回收率,而 35 nm 色譜柱的最佳回收率范圍為 35 nm 至 350 nm。
qEV尺寸排阻外泌體分離柱工作原理
qEV分離柱基于尺寸排阻色譜原理工作,即溶液中的分子和顆粒在通過由多孔樹脂顆粒組成的色譜柱時按其尺寸進行分離。在qEV分離中,較大的顆粒無法進入樹脂中的孔隙,而是相對較快地流過樹脂。相反,小于分離范圍下限(35 nm 或 70 nm)的顆粒則會進入樹脂中的孔隙,這會減慢它們的流動速度。通過這種基于尺寸大小的分離,EVs 和可溶性蛋白質(zhì)以高分離度分離,由此可以獲得純化體積。
qEV 分離柱廣泛用于細胞外囊泡 (EV) 領(lǐng)域,其原因不僅僅在于其易用性和溫和、高效。更重要的是qEV 分離柱使用尺寸排阻色譜 (SEC) 原理將污染的可溶性蛋白與外泌體和其他 EV 分離。IZON公司的 Gen 2 qEV 分離柱柱可去除大約 99% 的可溶性蛋白質(zhì)——提供比現(xiàn)有系列(傳統(tǒng) qEV 色譜柱)更高純度的樣品。由于非 EV 組件的共同分離會影響下游應(yīng)用和分析,因此 EV 分離中的純度問題是一個重要問題。使用 IZON公司的qEV 分離柱分離得到的EV,可以直接進行下游分析,包括可調(diào)電阻脈沖傳感、電子顯微鏡、蛋白質(zhì)組學和 RNA 分析。
qEV尺寸排阻外泌體分離柱操作流程
1. 用洗脫緩沖液沖洗柱子。
2. 裝入500μL樣品。
3. 最開始的3ml是空隙體積,繼續(xù)向分離柱中添加PBS以洗脫囊泡(外泌體)。
4. 收集空隙體積后的1.5mL液體為高純度外泌體。
qEV尺寸排阻外泌體分離柱優(yōu)勢
高純度:去除99%以上的可溶性蛋白質(zhì),去除95%以上高密度脂蛋白
無損傷:保持細胞外囊泡的完整性和生物功能
標準化:每根分離柱均經(jīng)過標準化、質(zhì)量保證,并通過ISO13485標準認證
可靠性:只要15min就可以得到完整外泌體樣本,已經(jīng)在大規(guī)模的實驗室試驗得到證實
適用性:適用于多種類型樣品的外泌體提取,包括:血清、血漿、尿液、細胞上清、腦脊液、唾液等;尤其適用于外泌體功能研究中,用于細胞培養(yǎng)或動物注射的高純度外泌體的獲得