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在OBL檢測中,小鼠骨髓源性成骨前體細(xì)胞在96孔板塑料表面培養(yǎng)14天,讓它們分化為成熟的骨形成成骨細(xì)胞。
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芬蘭藥物檢測服務(wù)公司的體外成骨細(xì)胞檢測(OBL檢測)提供了一種測定促成骨化合物對小鼠成骨細(xì)胞的分化和活性的影響的獨特方法。在OBL檢測中,小鼠骨髓源性成骨前體細(xì)胞在96孔板塑料表面培養(yǎng)14天,讓它們分化為成熟的骨形成成骨細(xì)胞。
在培養(yǎng)初期,通過向培養(yǎng)液中加入試驗化合物,可以研究試驗化合物對成骨細(xì)胞分化的影響。該培養(yǎng)在第14天結(jié)束,同時細(xì)胞內(nèi)的堿性磷酸酶(ALP),可以由作為成骨細(xì)胞形成數(shù)量指標(biāo)的細(xì)胞裂解液確定。
在成骨細(xì)胞分化后的第14天,通過向培養(yǎng)液加入試驗化合物,可以研究試驗化合物對成骨細(xì)胞活性的影響。繼續(xù)培養(yǎng)7天,使得成熟的成骨細(xì)胞形成骨。該培養(yǎng)在第21天結(jié)束,作為骨形成的指標(biāo),沉積進(jìn)骨節(jié)結(jié)的鈣(Ca)量將被測定。
本公司提供兩種標(biāo)準(zhǔn)項目類型的OBL檢測:初步項目和擴(kuò)展項目。初步項目為快速檢測大量化合物而設(shè)計的,每種化合物在2種不同濃度下重復(fù)檢測6次。本公司推薦使用初步項目的結(jié)果遴選合適的化合物進(jìn)行拓展項目的深入檢測。擴(kuò)展項目每種化合物在7種不同濃度下重復(fù)檢測8次,能夠得到化合物IC50值的可靠計算。細(xì)胞毒性檢測用以確定在檢測中所觀察到的抑制功效不是由于化合物的細(xì)胞毒素功效引起。
每一個96孔板包括與所有實驗組的結(jié)果進(jìn)行對照的加有賦形劑的基準(zhǔn)組,和檢測系統(tǒng)中體現(xiàn)期望功效的參照化合物的質(zhì)控組。在成骨細(xì)胞分化和活性檢測中,參考化合物都是BMP-4,一種成骨細(xì)胞分化和活性的催化劑。如果質(zhì)控組的結(jié)果與基準(zhǔn)組的結(jié)果沒有太大的區(qū)別,本公司將重復(fù)檢測而不收取客戶額外費用。
情況說明書
芬蘭藥物檢測服務(wù)公司的OBL檢測為測定促成骨化合物對小鼠成骨細(xì)胞影響而獨特設(shè)計的。我們提供OBL的以下標(biāo)準(zhǔn)項目類型:
初步項目:在2種不同濃度條件下重復(fù)檢測6次
擴(kuò)展項目:在7種不同濃度條件下重復(fù)檢測8次
本公司所有的工作都遵從質(zhì)量保證體系和標(biāo)準(zhǔn)操作流程(S.O.P)完成。在開展新項目前,本公司將和客戶一起準(zhǔn)備詳細(xì)的研究方案,并且本公司的研究主任將確保該項目按研究方案所擬定的內(nèi)容精確完成。
典型周轉(zhuǎn)周期:
初步項目: 可達(dá)50種化合物/3月
擴(kuò)展項目: 可達(dá)10種化合物/3月