Southern Blot

 方法步驟

以哺乳動(dòng)物基因組DNA為例，介紹Southern印跡雜交的基本步驟

1、 待測核酸樣品的制備

2、 瓊脂糖凝膠電泳分離待測DNA樣品

3、電泳凝膠預(yù)處理

4、轉(zhuǎn)膜

5、探針標(biāo)記

6、預(yù)雜交（prehybridizafion）

southern印跡雜交實(shí)驗(yàn)儀器

7、Southern雜交

8、洗膜

9、放射性自顯影檢測

結(jié)果注意

在膜上陽性反應(yīng)呈帶狀。實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意以下問題：轉(zhuǎn)膜必需充分，要保證DNA已轉(zhuǎn)到膜上。雜交條件及漂洗是保證陽性結(jié)果和背景反差對比好的關(guān)鍵。洗膜不充分會(huì)導(dǎo)致背景太深，洗膜過度又可能導(dǎo)致假陰性。若用到有毒物質(zhì)，必需注意環(huán)保及安全。

主要應(yīng)用

1.遺傳病診斷

2.DNA圖譜分析

3.PCR產(chǎn)物分析

服務(wù)周期       45個(gè)工作日