OCL檢測(體外破骨細(xì)胞測定)

芬蘭藥物檢測服務(wù)公司的體外破骨細(xì)胞檢測（OCL檢測）提供了一種確定抗骨吸收化合物對人破骨細(xì)胞分化或活性影響的獨特方法。在OCL檢測中，人類骨髓源性破骨前體細(xì)胞在含有M-CSF和RANKL的96孔板牛骨切片上培養(yǎng)7天，讓它們分化為成熟的骨吸收破骨細(xì)胞。

在培養(yǎng)初期，通過向培養(yǎng)液加入化合物，可以研究化合物對破骨細(xì)胞分化的影響。該培養(yǎng)在第7天結(jié)束，分泌的抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP 5b）（破骨細(xì)胞數(shù)量的標(biāo)志物）可用BoneTRAP試劑盒來對培養(yǎng)液進(jìn)行測定。（英國IDS 公司）

在破骨細(xì)胞分化后的第7天，通過向培養(yǎng)液加入化合物，可以研究化合物對破骨細(xì)胞活性的影響。第7天時更換培養(yǎng)液，TRACP 5b從第7天的培養(yǎng)液中測定，以此確定在添加化合物前破骨細(xì)胞的數(shù)量。繼續(xù)培養(yǎng)3天，使成熟的破骨細(xì)胞進(jìn)行骨的再吸收。在第10天，I型膠原C末端肽（CTX），骨膠原降解和重吸收量的標(biāo)志物，使用I型膠原C末端肽培養(yǎng)法（英國IDS 公司）對培養(yǎng)液進(jìn)行測定。最后，一個表征破骨細(xì)胞平均活性的重吸收指標(biāo)可以通過用破骨細(xì)胞的數(shù)量（第7天的TRACP 5b）除吸收獲得量（第10天的CTX）計算得出。如果有需要，我們的破骨細(xì)胞活性測試同樣能采用大鼠破骨細(xì)胞完成。

本公司提供兩種標(biāo)準(zhǔn)項目類型的OCL檢測，初步項目和擴展項目。初步項目為快速檢測大量化合物而設(shè)計的，每種化合物在2種不同濃度下重復(fù)檢測6次。本公司推薦使用初步項目的結(jié)果遴選合適的化合物進(jìn)行擴展項目的深入檢測。擴展項目每種化合物在7種不同濃度下重復(fù)檢測8次，可得到化合物IC50值的可靠計算。細(xì)胞毒性檢測是為確定在檢測中所觀察到的抑制功效不是由破骨細(xì)胞化合物的細(xì)胞毒素功效所致。

每一個96孔板包括與所有實驗組的結(jié)果進(jìn)行對照、加有賦形劑的基準(zhǔn)組，和檢測系統(tǒng)中體現(xiàn)期望功效的參照化合物的質(zhì)控組。在破骨細(xì)胞分化檢測中，參考化合物是護(hù)骨素，破骨細(xì)胞分化的抑制劑。在破骨細(xì)胞活性檢測中，參照化合物是E64，半胱氨酸蛋白酶和破骨細(xì)胞活性的抑制劑。如果質(zhì)控組的結(jié)果與基準(zhǔn)組的結(jié)果沒有太大的區(qū)別，本公司將重復(fù)檢測而不收取客戶額外費用。

情況說明書
芬蘭藥物檢測服務(wù)公司的OCL檢測是確定抗骨吸收化合物對人破骨細(xì)胞影響的獨特設(shè)計。我們提供OCL的以下標(biāo)準(zhǔn)項目類型：
初步項目：在2種不同濃度條件下重復(fù)檢測6次
擴展項目：在7種不同濃度條件下重復(fù)檢測8次

本公司所有的工作都遵從質(zhì)量保證體系和標(biāo)準(zhǔn)操作流程（S.O.P）完成。在開展新項目前，本公司將和客戶一起準(zhǔn)備詳細(xì)的研究方案，并且本公司的研究主任將確保該項目按研究方案所擬定的內(nèi)容精確完成。

典型周轉(zhuǎn)周期：
初步項目： 可達(dá)50種化合物/2月
擴展項目： 可達(dá)10種化合物/2月