DNA pull down/檢測DNA與其結(jié)合蛋白相互作用

技術(shù)服務(wù)描述
針對目標區(qū)域設(shè)計特異性DNA探針并經(jīng)過脫硫生物素標記，脫硫生物素探針可以和偶聯(lián)在磁珠上的鏈霉親和素親和結(jié)合。然后，細胞核提取物與磁珠-DNA探針孵育，作用蛋白質(zhì)分子可以和DNA探針特異性結(jié)合；經(jīng)過洗滌可以將非特異性結(jié)合蛋白質(zhì)去除；最后，經(jīng)洗脫液洗脫，得到目的DNA探針-蛋白質(zhì)復(fù)合物，再經(jīng)過Western Blot或質(zhì)譜（MS）鑒定蛋白質(zhì)類型。
服務(wù)流程
1. 根據(jù)研究目的決定研究方案
2. DNA序列T克隆
3. DNA生物素探針合成（標記方法：Biotin-14-CTP）
Biotin-14-CTP is a CTP analog with biotin attached at the N 4 -position of the pyrimidine base by a 14-atom linker. Biotin-14-CTP can be efficiently incorporated into RNA transcripts using T7, SP6, or T3 RNA polymerase and the appropriate template in the presence of ATP, GTP, UTP, and Biotin-14-CTP (1). The biotinylated RNA can be used as a probe in membrane-based or in situ hybridizations (2). The amount of material provided is sufficient for up to 20 transcription reactions (1 µg template).
4. DNA pull-down實驗
5. Western Blot檢驗（若需質(zhì)譜分析請另外咨詢）
6. 數(shù)據(jù)分析及Figure制作
 
客戶提供
1. 目的基因、目的蛋白信息
2. 需檢測的細胞樣品
 
如期提供
1. 原始數(shù)據(jù)、結(jié)果圖片
2. 標準實驗報告
3. SCI標準Result Figure