植物石蠟切片(番紅-固綠染色)
一、目的要求
1、 熟悉植物石蠟切片的制作過程。
2、 掌握番紅-固綠對(duì)染法的基本原理和具體方法。
二、實(shí)驗(yàn)原理
石蠟切片法也是在研究植物細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)等方面常用的制片方法。它可以使植物材料
切成薄的薄片,又可以切成連續(xù)薄片,切片經(jīng)染色,觀察效果甚好。番紅-固綠對(duì)染法,為植物制片上最普遍的一種二重染色法,其染色程序簡(jiǎn)單并能清晰地顯示出細(xì)胞的結(jié)構(gòu)。番紅
為堿性染料,能使細(xì)胞核及木質(zhì)化的細(xì)胞壁染成紅色;固綠為酸性染料,能使細(xì)胞質(zhì)及纖維
素的細(xì)胞壁染成綠色。
三、實(shí)驗(yàn)用品
(一) 器材
切片刀,切片機(jī),溫箱,溫臺(tái),解剖刀,鑷子,單面刀片,臺(tái)木,毛筆,蠟鏟,酒精燈,包
埋紙盒,染色缸,玻片盤,溫度計(jì),臉盆。
(二)試劑
FAA 固定液,1%番紅,1%固綠,各級(jí)酒精(30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%),二甲
苯,石蠟,郝普特氏明膠粘片劑,樹膠。
試劑配法:
1、FAA 固定液(福爾馬林-醋酸-灑精混合液)
福爾馬林 5 ml
50%或 70%的灑 90 ml
冰醋酸 5 ml
此液適用于植物組織,此液中的酒精,有用 50%的,也有用 70%的,一般薄嫩的材料右用
50%的,厚硬的材料用 70%的,醋酸的用量也可根據(jù)材料情況作適當(dāng)?shù)母淖,?duì)一些大塊而
密實(shí)的組織可增加用量,同時(shí)減少福爾馬林的用量。固定時(shí)間可因材料及醋酸含量的變化而
異,一般為 5~20h。固定的材料,一般無需用水洗,可直接從 70%的酒精開始脫水。
退回重染。
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創(chuàng)博生物科技工作室是一家專項(xiàng)從事植物、動(dòng)物細(xì)胞組織石蠟切片技術(shù)服務(wù)的工作室,成立于2017年6月。 本公司主要為高等院校,科研所等科研人員制作植物、動(dòng)物石蠟切片服務(wù)。本公司工作人員經(jīng)驗(yàn)豐富,技術(shù)過硬,對(duì)各種木本植物、草本植物的根、莖、葉石蠟切片具有精湛技術(shù)。微信:18249278195