熒光定量PCR(Real-time PCR),是指在 PCR 擴增反應(yīng)體系中加入熒光基團,通過對擴增反應(yīng)中每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實時檢測,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。
佳維斯分子蛋白實驗平臺可提供細胞培養(yǎng),核酸,蛋白提取、純化、鑒定、互作以及生理生化檢測等常規(guī)檢測:QPCR、WB、ELISA、質(zhì)譜、載體構(gòu)建、質(zhì)粒抽提、原位雜交、免疫共沉淀、細胞流式等,為研究人員提供生物學(xué)領(lǐng)域的全方位技術(shù)服務(wù)。
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以探針法熒光定量 PCR 為例:PCR 擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針兩端分別標(biāo)記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。開始時,探針完整地結(jié)合在 DNA 任意一條單鏈上,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收,檢測不到熒光信號;PCR 擴增時,Taq 酶將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條 DNA 鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與 PCR 產(chǎn)物形成完全同步。
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