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SNP分型服務(wù)應(yīng)用連接酶特異檢測(cè)反應(yīng)(LDR)技術(shù),即當(dāng)兩條寡核苷酸與互補(bǔ)靶DNA完全配對(duì)時(shí),連接反應(yīng)才能順利進(jìn)行,否則連接反應(yīng)不能進(jìn)行的原理,實(shí)現(xiàn)對(duì)SNP 位點(diǎn)的檢測(cè)。
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[發(fā)表評(píng)論] [本類其他服務(wù)] [本類其他服務(wù)商] |
服務(wù)商: 南京圣比澳生物科技有限公司 | 查看該公司所有服務(wù) >> |
目前主要應(yīng)用領(lǐng)域
◆復(fù)雜疾病的易感性基因分析與基因定位
◆環(huán)境因子易感基因的檢出與病原體基因分析
◆藥物開發(fā)與個(gè)體用藥
◆個(gè)體識(shí)別與法醫(yī)鑒定
◆系統(tǒng)發(fā)育分析與病理分子遺傳機(jī)理的闡明
◆生物進(jìn)化與遺傳分析
主要服務(wù)方案
SNP分型服務(wù)主要利用連接酶特異檢測(cè)技術(shù),對(duì)需檢測(cè)SNP位點(diǎn)設(shè)計(jì)特異性探針,在連接酶的作用下,當(dāng)特異性的寡核苷酸探針與互補(bǔ)靶序列DNA完全配對(duì)時(shí)連接反應(yīng)順利進(jìn)行,若寡核苷酸探針與其不完全配對(duì),則連接反應(yīng)不能進(jìn)行。最后通過測(cè)序儀檢測(cè),得到分型結(jié)果。
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核心技術(shù):
◆多重PCR
◆多重LDR
◆Megabace 電泳檢測(cè)
原理示意圖:
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服務(wù)流程 |
分型樣品的要求: |
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1、若分型樣品為基因組DNA或質(zhì)粒DNA ,樣品要求:DNA濃度≥5ng/ul,體積≥10ul,純度 OD 260/280 在1.7~1.9之間。如果客戶要求提供樣品純化服務(wù),我們對(duì)每個(gè)樣品將收取10元純化費(fèi)。 |
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客戶將得到的數(shù)據(jù) |
不斷發(fā)展,不斷完善 |
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1.SNPs結(jié)果(ExceL表格); 2.實(shí)驗(yàn)過程中涉及的電泳圖,測(cè)序峰型圖(見下樣圖); 3.擴(kuò)增和反應(yīng)體系所涉及的引物序列; 4.客戶所需的其它資料。 ![]() |
為滿足客戶大批量樣品檢測(cè)的要求,公司正在引進(jìn)高通量SNPlex技術(shù),SNPlexGenotyping System 是基于熒光檢測(cè)方法來進(jìn)行的,其檢測(cè)原理:DNA模板直接與一套3個(gè)探針組成的系統(tǒng)結(jié)合,這3個(gè)探針包括2個(gè)等位基因特異性探針(ASO探針)和一個(gè)位點(diǎn)特異性探針(LSO探針);當(dāng)ASO探針和LSO探針與模板完全匹配時(shí),連接酶連接兩條探針。然后,使用生物素標(biāo)記的PCR引物擴(kuò)增該連接產(chǎn)物。生物素標(biāo)記的擴(kuò)增產(chǎn)物結(jié)合在鏈霉親和素包被的雜交板孔中,通過堿變性的方法使生物素標(biāo)記的單鏈PCR產(chǎn)物保留在雜交板中,然后該單鏈PCR產(chǎn)物的特殊部位與一套通用Zipchute探針雜交結(jié)合。這些探針帶有熒光標(biāo)記,它們具有特殊的片段與單鏈PCR產(chǎn)物的特殊部位互補(bǔ),還包括有修飾部分,一條Zipchute探針對(duì)應(yīng)一個(gè)待檢測(cè)等位基因。然后將雜交捕獲到的Zipchute探針分離出來,通過毛細(xì)管電泳進(jìn)行檢測(cè),最后通過GeneMapper軟件分析來確定SNP的基因型。 此方法具有檢測(cè)通量高、分型快、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)靈活、在實(shí)驗(yàn)應(yīng)用中可升級(jí)空間大等優(yōu)點(diǎn)。 |