酵母雙雜交

酵母雙雜交系統(tǒng)是一種直接在真核細胞內(nèi)檢測蛋白相互作用的方法，具有靈敏度高和特異性好的優(yōu)點。玉華公司提供多套酵母雙雜交系統(tǒng)，
1.Clontech公司基于GAL4轉(zhuǎn)錄因子特性建立的一套系統(tǒng)，可用于檢測多種蛋白-蛋白間的相互作用，是一種有效的檢測方法。
2.Stratagene CytoTrap 雙雜交系統(tǒng)可以稱作是酵母細胞質(zhì)雙雜交系統(tǒng)，是在Ras 途徑的基礎(chǔ)上建立的，可對胞質(zhì)蛋白、膜蛋白、轉(zhuǎn)錄因子、inhibitors作為bait蛋白進行酵母雙雜交

一、客戶提供材料

客戶可提供載有誘餌基因的質(zhì)粒；也可提供基因名稱，登錄號。

二、誘餌基因載體構(gòu)建

1) 亞克隆

2) 將誘餌基因構(gòu)建至BD載體中，測序確保無突變； 

3) 檢測BD載體中誘餌蛋白的表達，SDS-PAGE電泳及Western-blot檢測；檢測誘餌蛋白是否有毒性；是否存在自激活現(xiàn)象。

三、文庫篩選

1）使用公司具有的篩選文庫，或者應(yīng)客戶要求購買文庫（有時客戶自己提供特制的文庫），文庫篩選，陽性克��；

2）抽提質(zhì)粒，共轉(zhuǎn)化再次驗證陽性克隆；

3）排除假陽性，對克隆進行測序及生物信息學分析。

上海玉華生命科技發(fā)展有限公司（http://www.yh-keji.com/main.asp ）

電話 021-65030614—208  汪博士 021-65030607   海倫

郵箱： shiyan@yh-keji.com

傳真   021-65790714