,尚柏生物醫(yī)學技術(shù)(北京)有限公司">
English | 中文版 | 手機版 企業(yè)登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
當前位置 > 技術(shù)服務(wù) > 生物研發(fā)服務(wù)> 分子與細胞 > 總RNA的提取
總RNA的提取

總RNA的提取


總RNA的提取
RNA是一種重要的遺傳信息分子,完整RNA的提取和純化,是進行Northern雜交、RT-PCR、定量PCR等RNA相關(guān)研究的重要前提。

服務(wù)類別:分子與細胞總訪問:3770
最后更新:2009-9-15半年訪問:11
參考報價:
立即詢價 電話咨詢
[發(fā)表評論] [本類其他服務(wù)] [本類其他服務(wù)商]
服務(wù)商: 尚柏生物醫(yī)學技術(shù)(北京)有限公司 查看該公司所有服務(wù) >>
  • 服務(wù)介紹
  • 公司簡介
總RNA的提取

RNA是一種重要的遺傳信息分子,完整RNA的提取和純化,是進行Northern雜交、RT-PCR、定量PCR等RNA相關(guān)研究的重要前提。

基本步驟
1. 樣品預處理
客戶需提供新鮮的樣品或取樣后立即在低溫(-20℃或-70℃)冷凍保存的樣品,避免反復凍溶,反復凍溶會導致RNA的降解和提取量下降。
● 植物組織——液氮研磨
● 動物組織——勻漿、液氮研磨
● 培養(yǎng)細胞——蛋白酶K消化
● 細    菌——溶菌酶消化
● 酵    母——液氮研磨、玻璃珠破碎
2. 細胞裂解(異硫氰酸胍/苯酚法)
● 這是傳統(tǒng)的提取RNA的方法,適用于大部分動植物材料。異硫氰酸胍能使核蛋白復合體解離,并將RNA釋放到溶液中,采用酸性酚-氯仿混合液抽提,低PH值的酚將使RNA進入水相,而蛋白質(zhì)和DNA仍留在有機相,從而完成RNA的提取工作。
3. RNA的純化(有機溶解抽提法)
● 用氯仿抽提裂解液,去除蔗糖、蛋白等雜質(zhì),并促進水相與有機相的分離。高速離心后收集水相,用0.6倍體積的異丙醇或與水相等體積的異丙醇沉淀RNA。室溫沉淀20-30分鐘,低溫高速離心,獲得RNA沉淀。用無RNase的75%乙醇洗滌RNA沉淀,干燥后用適量RNase-free ddH2O 溶解RNA沉淀。
4. RNA的檢測
● RNA完整性檢測
用甲醛變性凝膠電泳檢測RNA的完整性。
● RNA得率檢測
用分光光度計測定RNA溶液在260nm處的吸光值。用標準品測得在波長在260nm,1ug/mlRNA鈉鹽吸光度為0.025(光程為1cm),即OD260=1時,樣品中RNA濃度為40ug/ml。
● 總RNA濃度(ug/ml)=OD260×稀釋倍數(shù)×40ug/ml
5. RNA純度檢測
● 通過OD260/OD280檢測RNA純度。
● OD260/OD280值在1.9-2.1之間,RNA的純度較好
● OD260/OD280值小于1.8,表明蛋白雜事較多
● OD260/OD280值大于2.2,表明RNA已經(jīng)降解

價格.實驗周期

 服務(wù)項目  樣品要求  收費標準  實驗周期
 細胞總RNA提取  細胞用量:1x104—1x106個,新鮮培養(yǎng)(1-2天)  100元/樣品  5個工作日 
 組織總RNA提取  組織用量:500mg,新鮮標本或液氮凍存的標本  120元/樣品  5個工作日 
 血液總RNA提取  血液用量:5ml,新鮮或液氮凍存的標本  120元/樣品  7個工作日 
 菌液總RNA提取  對數(shù)生長期的新鮮菌液1~2ml  80元/樣品  5個工作日 

以上實驗周期是針對正常實驗樣品制定的,樣品特殊或樣品多時除外。

提供結(jié)果
包括總RNA的瓊脂糖凝膠電泳圖、OD值測定結(jié)果、總RNA的濃度。

bio-equip.com
售后服務(wù)
快速詢價登錄注冊在線詢價 (請留下您的聯(lián)系方式,以便供應商聯(lián)系您)
* 姓  名:
* 地  區(qū):
* 單  位:
職  位:
* 手機/電話:
* E-mail:
請寄產(chǎn)品資料:
需要 不需要
請報價格:
需要報價 不需要報價
留  言:
驗證碼:
換一張
發(fā)表評論在線評論(0條)
手機版:總RNA的提取
更多瀏覽該公司同類服務(wù)
您最近瀏覽過的服務(wù)
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網(wǎng) 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com
立即詢價