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全長(zhǎng)鳥槍法測(cè)序
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全長(zhǎng)鳥槍法測(cè)序 |
全基因組測(cè)序主要有二種策略,一種是分級(jí)鳥槍法測(cè)序,另一種是全基因組鳥槍法測(cè)序.微生物是一種十分重要的遺傳資源,運(yùn)用全基因組鳥槍法可以方便、快捷地完成其基因組的測(cè)序任務(wù).。 信利來公司擁有ABI3730xl測(cè)序平臺(tái)和齊全的配套設(shè)施,其全基因組鳥槍法測(cè)序(Whole Genome Shotgun Sequencing),無需構(gòu)建各類復(fù)雜的物理圖譜和遺傳圖譜,采用最經(jīng)濟(jì)有效的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案,直接將整個(gè)基因組打成不同大小的DNA片段構(gòu)建Shotgun文庫(kù),對(duì)文庫(kù)進(jìn)行隨機(jī)測(cè)序,最后運(yùn)用生物信息學(xué)方法將測(cè)序片段拼接成全基因組序列。信利來公司測(cè)序平臺(tái)目前已經(jīng)完成十余例50kb到500kb大小基因組測(cè)序服務(wù)項(xiàng)目,積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)。 全基因組鳥槍法測(cè)序的主要步驟是:第一,建立高度隨機(jī)、插入片段大小為1.6kb到4kb左右的基因組文庫(kù)?寺(shù)要達(dá)到一定數(shù)量,即經(jīng)過兩端測(cè)序的克隆片段的堿基總數(shù)應(yīng)達(dá)到基因組大小的6到10倍。第二,高效、大規(guī)模的克隆雙向測(cè)序。第三,序列拼裝。借助Phred, Phrap, Consed 軟件進(jìn)行序列組裝,產(chǎn)生一定數(shù)量的contig。第四,填補(bǔ)缺口。有兩種待填補(bǔ)的缺口,一是沒有相應(yīng)模板DNA的物理缺口,我們通過PCR的方法進(jìn)行填補(bǔ);二是有模板DNA但未測(cè)到的序列缺口。我們直接在模板DNA上設(shè)計(jì)引物測(cè)序。 項(xiàng)目適用范圍
服務(wù)內(nèi)容
樣品要求 動(dòng)物、植物、微生物組織請(qǐng)?zhí)峁┳懔康男迈r樣品(4℃保存,不超過一天)或?qū)⑿迈r樣品立即存于液氮或-80℃,一周內(nèi)寄樣。 已純化 DNA要求濃度>10ng/ul ,最小量>20ug,OD 260 /OD 280值:1.80~2.00 服務(wù)費(fèi)用
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