細(xì)胞技術(shù)專題：大鼠大腦皮層神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)

1. 上面的步驟是傳統(tǒng)方法。有許多地方可以進(jìn)行改動(dòng)：如消化時(shí)可以直接用0.125-0.25%的胰酶消 化15-20 min 左右，也可用 DNA 酶進(jìn)行消化，有人還直接進(jìn)行吹打，都可行。

 

2. 上面雖然時(shí)大鼠皮層神經(jīng)元，但是同樣適用于小鼠，但是應(yīng)該選擇孕13 d 左右的小鼠。

 

3. 神經(jīng)元是一種比較難培養(yǎng)的細(xì)胞，因此在接種時(shí)細(xì)胞的密度一定要夠。

 

4. 在玻片上培養(yǎng)神經(jīng)元時(shí)，一定要注意玻片的來(lái)源和處理方法，這個(gè)非常重要，對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的影響 是很大的。如果您現(xiàn)在在玻片上培養(yǎng)的神經(jīng)元生長(zhǎng)情況還不錯(cuò)的話，那么您在以后的培養(yǎng)中最好還是用同 一來(lái)源(廠家)的玻片。

 

5. 如果有B27 和neurobasal 培養(yǎng)基，那么就方便了(不用加 AraC):

 

(1)把細(xì)胞懸液用(DMEM＋20%FBS)懸浮，種到培養(yǎng)皿上6－12 h 后，全量換成 2% B27 的 neurobasal 培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)，3 d 半量換液。

 

(2)把細(xì)胞懸液用直接用 2% B27 的 neurobasal 培養(yǎng)基懸浮接種。

 

(3)可以用新生1 d 內(nèi)的胎鼠皮層直接培養(yǎng)。