微生物學(xué)技術(shù)：紫外線滅菌實驗
紫外線滅菌是用紫外線燈進行的，波長為200~300 nm 的紫外線都有殺菌能力，其中以260 nm 的殺菌力最強。在波長一定的條件下，紫外線的殺菌效率與強度和時間的乘積成正比。紫外線殺菌機制主要是因為它誘導(dǎo)了胸腺嘧啶二聚體的形成，從而抑制了DNA的復(fù)制。
實驗方法
- 紫外線滅菌
| 實驗方法原理 | 由于輻射能使空氣中的氧電離成［O］，再使O2氧化生成臭氧（O3）或使水（H2O）氧化生成過氧化氫（H2O2），O3和H2O2均有殺菌作用。紫外線穿透力不大，所以，只適用于無菌室、接種箱、手術(shù)室內(nèi)的空氣及物體表面的滅菌。紫外線燈距照射物以不超過1.2 m 為宜。 |
|---|---|
| 試劑、試劑盒 |
石炭酸 來蘇爾溶液 牛肉膏蛋白胨平皿 |
| 儀器、耗材 |
紫外線燈 |
| 實驗步驟 |
1. 單用紫外線照射
（1）在無菌室內(nèi)或在接種箱內(nèi)打開紫外線燈開關(guān)，照射30分鐘，將開關(guān)關(guān)閉。 （2）將牛肉膏蛋白胨平皿蓋打開15分鐘，然后蓋上皿蓋，置37℃培養(yǎng)24小時。共做三套。 （3）檢查每個平皿上生長的菌落數(shù)。如果不超過4個，說明滅菌效果良好，否則，需延長照射時間或同時加強其他措施。 2. 化學(xué)消毒劑與紫外線照射結(jié)合使用 （1）在無菌室內(nèi)，先噴灑3~5%的石炭酸溶液，再用紫外線燈照射15分鐘。 （2）無菌室內(nèi)的桌面、凳子用2~3%來蘇爾擦洗，再打開紫外線燈照射15分鐘。 （3）檢查滅菌效果。 由于紫外線對眼結(jié)膜及視神經(jīng)有損傷作用，對皮膚有刺激作用，所以，不能直視紫外線燈光，更不能在紫外線燈光下工作。 |
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