腔腸素和發(fā)光蛋白等生物發(fā)光類產(chǎn)品--NanoLight

熒光素酶（Luciferases)、發(fā)光蛋白（Photoproteins)和熒光蛋白（Fluorescent Proteins)，這三類蛋白來源于生物發(fā)光物種，經(jīng)常被用作細(xì)胞學(xué)研究、代謝途徑探索以及高通量篩選（HTS)的報(bào)告基因。

熒光素酶能夠催化熒光素底物（如腔腸素）的酶促氧化反應(yīng)，并且該反應(yīng)伴隨著發(fā)光。不同于第一代螢火蟲熒光素酶系統(tǒng)，這些基于腔腸素的熒光素酶（NanoLight）不需要使用ATP和輔酶A等高能量分子，從而極大地簡(jiǎn)化了它們?cè)诒姸鄨?bào)告子應(yīng)用的使用方式。海腎（Gaussia princps）熒光素酶是最小并且最明亮的腔腸素?zé)晒馑孛�，它是一種5mm長(zhǎng)的撓足類動(dòng)物，罕見地分布于700-900米深的海底。海腎熒光素酶適用于單個(gè)神經(jīng)囊泡釋放的觀察，以及通過直接和定量地方式進(jìn)行胰島素的去極化和釋放成像。

發(fā)光蛋白（水母蛋白和螅蛋白）預(yù)填充腔腸素和分子氧，當(dāng)鈣促發(fā)氧化反應(yīng)時(shí)出現(xiàn)閃光。發(fā)光蛋白通常需要一個(gè)還原性的環(huán)境以及含量極低的鈣，否則鈣的存在會(huì)使得發(fā)光蛋白發(fā)出的的光強(qiáng)像熒光素酶一般。

綠色熒光蛋白（NanoFluor）自發(fā)熒光，因?yàn)樗�是一種獨(dú)特的轉(zhuǎn)錄后自組裝多肽衍生發(fā)色團(tuán)。綠色熒光蛋白能夠?qū)�熒光素酶或者發(fā)光蛋白的波長(zhǎng)從藍(lán)色轉(zhuǎn)變成綠色，適用于研究全細(xì)胞的基因表達(dá)，以及監(jiān)測(cè)不同時(shí)間和劑量下的藥物-靶標(biāo)互作。

NanoLight公司獨(dú)特的綠色熒光蛋白和熒光素酶性能，能夠通過Phase I SBIR評(píng)估BRET（生物發(fā)光能量傳遞）用作一種新型生物傳感器的可行性。BRET潛在的廣泛性應(yīng)用領(lǐng)域包括HTS、醫(yī)學(xué)診斷以及基礎(chǔ)研究。它最顯著的優(yōu)勢(shì)在于，在結(jié)合或者靠近事件發(fā)生時(shí)，能夠提供空間和定位信息。例如，海鰓綠色熒光蛋白（Ptilosarus)已經(jīng)被發(fā)現(xiàn)在所有的熒光蛋白中，其自然量子效率最高。海鰓和水母綠色熒光蛋白已經(jīng)被密碼子優(yōu)化過，并且被應(yīng)用于細(xì)胞組學(xué)的高內(nèi)涵篩選，以及被Molecular Devices公司和Rigel Pharmaceuticals公司所開發(fā)應(yīng)用。啟維益成提供Nanolight全線產(chǎn)品。

NanoLight公司認(rèn)為，基礎(chǔ)研究人員、藥物篩選人員和農(nóng)藥化學(xué)企業(yè)，才剛剛開始在他們的研究、篩選和探究工作中利用到這種自然發(fā)生的生物發(fā)光團(tuán)的能力。利用標(biāo)準(zhǔn)光度計(jì)檢測(cè)絕大多數(shù)可見光譜的技術(shù)還有待開發(fā)，NanoLights公司專注于開發(fā)生物發(fā)光報(bào)告系統(tǒng)，并使其能夠輕易地與ELISA檢測(cè)系統(tǒng)兼容，還能通過一系列策略直接進(jìn)行活體成像、細(xì)胞示蹤和DNA-DNA/DN-RNA/核苷酸-多肽的檢測(cè)，還開發(fā)熒光素酶分離技術(shù)。