華盛頓大學(xué)X. H. Gao教授和埃默里大學(xué)R. M. O’Regan教授課題組,將525 nm, 565 nm, 605 nm, 655 nm 和705 nm發(fā)射波長的量子點,直接與HER2, ER, PR, EGFR 和 mTOR的一抗進行偶聯(lián)。上述分子是臨床重要的乳腺癌標志物,對于乳腺癌診斷、預(yù)后及個性化治療具有重要意義。該課題組將量子點偶聯(lián)抗體用于石蠟包埋組織切片染色,并進行了光譜定量分析,同時與IHC、Western blotting(WB)、FISH等方法進行比較。其研究結(jié)果顯示,當?shù)鞍妆磉_水平較低時,量子點的定量光譜分析比傳統(tǒng)IHC方法更精確,同時與WB方法相關(guān)性良好;FISH分析中,HER2基因擴增與基于量子點檢測的HER2蛋白表達相關(guān)性良好,而且量子點偶聯(lián)抗體可用于檢測低水平的HER2蛋白表達。
總之,量子點偶聯(lián)抗體可以很好地適用于腫瘤標志物的體外分子譜檢測分析,其優(yōu)勢主要表現(xiàn)為:
①量子點的熒光亮度更強,靈敏度更高,可加強對低豐度靶點的檢出;
②量子點熒光探針耐光漂白、不會出現(xiàn)光淬滅,熒光穩(wěn)定性強,非常適用于定量分析和光譜分析。
③單一激發(fā)、多色成像,不同顏色熒光之間干擾小,適合多指標同時成像和定量分析。
石蠟組織切片的多腫瘤標志物原位分子表達譜分析
上圖:不同發(fā)射波長(525/565/605/655 /705 nm)的量子點,分別與乳腺癌標志物HER2/ER/PR/EGFR/mTOR的一抗進行偶聯(lián),然后對乳腺癌病人的病理切片進行五色共染。
下圖:針對上圖染色結(jié)果進行光譜定量分析。
文獻來源:
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