脂肪干細(xì)胞的有效分離、培養(yǎng)及保存方法

      近日，經(jīng)研究人員試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，旨在分離、培養(yǎng)和凍存大鼠脂肪干細(xì)胞，并對(duì)其相關(guān)的細(xì)胞表型進(jìn)行研究，為利用脂肪干細(xì)胞治療梗阻性腎*腎纖維化等實(shí)驗(yàn)提供依據(jù)。研究指出，建立了一種脂肪干細(xì)胞的有效分離、培養(yǎng)及保存方法，并對(duì)其表面標(biāo)志物進(jìn)行鑒定，為利用脂肪干細(xì)胞進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究提供了依據(jù)。

     取大鼠3只，經(jīng)消毒麻醉，采集其腹股溝處脂肪組織分離培養(yǎng)其中的脂肪干細(xì)胞，用相差倒置顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)方式及形態(tài)變化。取第三代細(xì)胞用流式細(xì)胞儀作細(xì)胞免疫表型的鑒定。凍存復(fù)蘇后再次檢測(cè)干細(xì)胞生長(zhǎng)情況及表型。

      大鼠脂肪組織中含有大量間充質(zhì)干細(xì)胞，原代培養(yǎng)的ASCs呈小圓形或星形，經(jīng)傳代后的脂肪干細(xì)胞形態(tài)比較均一，呈長(zhǎng)梭形，個(gè)別略呈多角形、漩渦樣生長(zhǎng)。其細(xì)胞表型為CD29、CD44高表達(dá)，CD73、CD105中等程度表達(dá)，CD34極低表達(dá)。脂肪干細(xì)胞經(jīng)低溫凍存3個(gè)月，復(fù)蘇后，生長(zhǎng)活力和存活率與凍存前未見(jiàn)明顯區(qū)別，CD44和CD29檢測(cè)與凍存前表達(dá)率也一致。