紅細(xì)胞裂解液操作方法

紅細(xì)胞裂解液(RBL Buffer)是一種從組織或血液中分離淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞或其它種類的細(xì)胞，特異地裂解紅細(xì)胞，以去除由于紅細(xì)胞混雜所造成的干擾的裂解液。通過其優(yōu)化配方，此裂解液可在單細(xì)胞懸液中（如小鼠脾臟單細(xì)胞懸液和人末梢血樣品）大程度的裂解紅細(xì)胞，同時(shí)最小程度的影響其它種類的細(xì)胞。本裂解液不適用于有細(xì)胞核紅細(xì)胞的裂解，如鳥或禽類的紅細(xì)胞。
紅細(xì)胞裂解液操作方法

 

1. 該制品濃度為1×，可直接使用。

2. 向1倍體積抗凝全血中加入5倍體積的RBL Buffer，混合均勻，室溫放置10min使紅細(xì)胞充分裂解為透明狀。例如：向1 ml抗凝全血中加入5ml RBL Buffer充分混合均勻。 

3. 3000rpm室溫離心10min，棄上清，留取底部細(xì)胞團(tuán)塊。

4. 重新加入5倍體積的RBL Buffer重懸底部細(xì)胞團(tuán)塊，用移液器反復(fù)吹吸混合均勻，室溫放置10min。

5. 3000rpm室溫離心10min，棄上清，留取底部細(xì)胞團(tuán)塊。如仍然存在明顯的紅細(xì)胞，則重復(fù)步驟4直至沒有紅細(xì)胞為止。