避暗儀分為明、暗兩室,其間有一直徑為3cm的圓洞,兩室底部均鋪以銅柵。暗室底部銅柵可通電,電壓通過按鈕調(diào)節(jié),一般為40V,50Hz。實驗分為訓(xùn)練和測試兩部分,訓(xùn)練時暗室底部銅柵通電。
訓(xùn)練
①MOS法:訓(xùn)練在一天內(nèi)完成,先將小鼠放入避暗儀中適應(yīng)環(huán)境3 min,訓(xùn)練時將小鼠背對洞口放入明室內(nèi),其進入暗室受到電擊即取出;
②MOL法:訓(xùn)練在一天內(nèi)完成,小鼠適應(yīng)環(huán)境3min,訓(xùn)練3min;
③MUL法:連續(xù)3天在同一時間將小鼠放入避暗儀中適應(yīng)3min,第三天適應(yīng)完成后開始訓(xùn)練,3min后取出。適應(yīng)環(huán)境和訓(xùn)練時任小鼠在明室和暗室之間自由穿梭,步入潛伏期大于3min者棄去不用。
測試訓(xùn)練完成24h后將小鼠再次放入明室,記錄其第一次進入暗室所需的時間,即步入潛伏期(step through latency, STL)和5min內(nèi)進入暗室的次數(shù),即錯誤次數(shù)(error times, ETs)。若5min內(nèi)小鼠未進入暗室則STL記為300s,ETs記為0。
避暗實驗依鼠類的嗜暗習(xí)性而設(shè)計,小鼠受電擊而減少向暗室移動的行為,屬于被動回避性條件反射。這種暗環(huán)境被動回避可表現(xiàn)出小鼠受電擊后不敢進入暗室而下一次避暗過程再次進入的特點,即應(yīng)激刺激的學(xué)習(xí)性和遺忘性,而應(yīng)激對小鼠記憶亦有損害作用。
在實驗中觀察到剛放入明室的小鼠會出現(xiàn)洗臉、舔毛等刻板動作,可能是陌生環(huán)境刺激所致,這種刺激有增強小鼠應(yīng)激反應(yīng)從而影響訓(xùn)練效果的可能。研究表明,小鼠對新環(huán)境的記憶比回避反應(yīng)更易消退,訓(xùn)練時的應(yīng)激狀態(tài)可能使適應(yīng)失去作用,測試過程小鼠受陌生環(huán)境的刺激,影響記憶的再現(xiàn)。
綜上所述,小鼠對環(huán)境的適應(yīng)程度可能在較大程度上影響了避暗實驗的結(jié)果,多次適應(yīng)限時訓(xùn)練是相對合適的訓(xùn)練方法。
附錄SuperPAS避暗實驗軟件廣泛用于學(xué)習(xí)記憶功能、認知神經(jīng)科學(xué)、神經(jīng)生理學(xué)、神經(jīng)藥理學(xué)、認知功能退行性變性等實驗研究方面的研究,簡單易操作,容易判別結(jié)果,可信度高,既可單獨作為檢測實驗提供課題參數(shù),也可以作為其他學(xué)習(xí)記憶和認知功能實驗的輔助或預(yù)篩選實驗。
測試指標