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VisuTrack對(duì)曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、懸尾實(shí)驗(yàn)及三箱社交實(shí)驗(yàn)的同步檢測(cè)

瀏覽次數(shù):1588 發(fā)布日期:2022-5-20  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
三廂社交檢測(cè)
本部分實(shí)驗(yàn)步驟根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)所報(bào)道的方法略作修改,用于評(píng)價(jià)小鼠對(duì)于陌生目標(biāo)的社交偏好。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將小鼠放在行為測(cè)試房間適應(yīng)1 h,隨后將小鼠放入檢測(cè)廂中,檢測(cè)廂被白色的玻璃樹(shù)脂板分隔成三個(gè)聯(lián)通的空間。將陌生CD1小鼠隨機(jī)放進(jìn)左側(cè)或右側(cè)箱子里的塑料籠里(與社會(huì)接觸實(shí)驗(yàn)中使用的籠子相同),另外一側(cè)箱子的塑料籠子為空,去掉隔開(kāi)箱子的玻璃樹(shù)脂板,使測(cè)試小鼠在三個(gè)箱子中自由活動(dòng) 5min,記錄測(cè)試小鼠分別在兩個(gè)廂中的持續(xù)時(shí)間。
整個(gè)測(cè)試過(guò)程均由VisuTrack動(dòng)物行為分析軟件(上海欣軟,中國(guó))進(jìn)行數(shù)據(jù)采集和分析。
曠場(chǎng)檢測(cè)(open field test,OFT)
參考相關(guān)文獻(xiàn)描述,并結(jié)合實(shí)驗(yàn)室條件進(jìn)行適應(yīng)性改變。訂制曠場(chǎng)檢測(cè)專用箱,首先將小鼠放入曠場(chǎng)檢測(cè)箱中,自由活動(dòng)15 min,同時(shí)由 VisuTrack動(dòng)物行為分析軟件進(jìn)行拍攝、錄制和軌跡記錄,統(tǒng)計(jì)小鼠檢測(cè)箱中的運(yùn)動(dòng)總距離。本行為學(xué)可通過(guò)記錄小鼠的總運(yùn)動(dòng)距離來(lái)反映小鼠的運(yùn)動(dòng)能力。
懸尾檢測(cè)
參考相關(guān)文獻(xiàn)描述,結(jié)合VisuTrack動(dòng)物行為分析軟件的自動(dòng)分析功能,通過(guò)對(duì)小鼠不動(dòng)時(shí)間的判定衡量小鼠的焦慮水平。將小鼠放入檢測(cè)房間適應(yīng) 1 h,首先用被剪裁過(guò)的塑料槍頭套在C57BL/6J 小鼠尾巴上,防止小鼠攀爬,醫(yī)用膠帶固定尾巴末端處,然后將其懸吊于懸尾檢測(cè)架上,小鼠距離地面高度約25 cm。因處于非正常的倒掛狀態(tài),小鼠表現(xiàn)出掙扎等行為,采用VisuTrack動(dòng)物行為分析軟件進(jìn)行記錄和觀察,實(shí)時(shí)分析并統(tǒng)計(jì) 6min 內(nèi)小鼠不動(dòng)時(shí)間。
鈣信號(hào)光纖記錄
鈣信號(hào)光纖記錄(fiber photometry recording)是一種實(shí)時(shí)檢測(cè)細(xì)胞活性變化的手段。其原理是通過(guò)利用GCa MP6m,一種鈣離子濃度敏感蛋白,檢測(cè)特定神經(jīng)元內(nèi)鈣離子信號(hào)的變化情況,記錄生理?xiàng)l件下特定神經(jīng)元熒光信號(hào)的變化,根據(jù)熒光信號(hào)的變化來(lái)分析特定神經(jīng)元的活動(dòng),進(jìn)而將神經(jīng)元信號(hào)的改變和行為學(xué)反應(yīng)聯(lián)系起來(lái),研究神經(jīng)元的行為學(xué)功能。本課題主要記錄小鼠在焦慮抑郁相關(guān)的行為實(shí)驗(yàn)范式下神經(jīng)元信號(hào)的改變。

首先采用 4周C57BL/6J小鼠 , 根據(jù)前所述的方法d CA3 注射AAV-Ca MKIIα-GCa MP6s-WPREs-p A 病毒,并在注射位置植埋光纖,待4周后,病毒充分表達(dá),我們就將小鼠置于籠中,將其與一只CD1小鼠進(jìn)行 5min接觸檢測(cè),同時(shí)使用在體光纖記錄儀進(jìn)行記錄,同時(shí)使用VisuTrack動(dòng)物行為分析軟件對(duì)社交行為進(jìn)行記錄,將其社交接觸信號(hào)和記錄的鈣信號(hào)進(jìn)行偶聯(lián)分析,計(jì)算并統(tǒng)計(jì)在社交行為期間小鼠d CA3腦區(qū)中的 ΔF/F值。

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