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特殊血清種類與使用詳解

瀏覽次數(shù):2627 發(fā)布日期:2022-8-1  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)


 

特殊加工工藝血清
 

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透析血清

(貨號(hào):C3820-0050/0100/0500)

 

常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)需要添加血清來(lái)維持細(xì)胞的增殖能力,盡管血清可以滿足一般細(xì)胞培養(yǎng)需求,但在進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分優(yōu)化和標(biāo)記特定成分進(jìn)行研究的實(shí)驗(yàn)中,仍需要去除某些特定的成分,常用的去除方法有透析。

 

透析是將血清循環(huán)通過(guò)中空纖維,并在血清中補(bǔ)充生理鹽水以維持滲透壓,移除分子量小于10,000Da的小分子,如氨基酸、葡萄糖、鹽離子和未結(jié)合的蛋白等。

 

因此透析胎牛血清主要用于關(guān)注小分子濃度的特殊研究,包括:研究蛋白質(zhì)組學(xué)、同位素標(biāo)記、細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)和報(bào)告基因分析、報(bào)告基因細(xì)胞系的篩選等。

 

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碳吸附血清

(貨號(hào):C3830-0050/0100/0500)

 

在進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分優(yōu)化和標(biāo)記特定成分進(jìn)行研究的實(shí)驗(yàn)中,需要去除某些特定的背景成分,常用的去除方法有碳吸附,使用活性碳和右旋糖苷去除血清中的親脂類(lipophilic)物質(zhì);钚蕴磕軌蚪Y(jié)合脂溶性分子,通過(guò)碳吸附可降低血清中許多激素及生長(zhǎng)因子的濃度,如雌二醇、皮質(zhì)醇、皮質(zhì)酮、孕酮、B類維生素、睪酮及T3、T4、前列腺素等。該血清適用于上述一些分子可能干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的實(shí)驗(yàn)中,對(duì)于那些需要這些分子的細(xì)胞培養(yǎng),也可能降低細(xì)胞生長(zhǎng)性能。

 

適用于:培養(yǎng)干細(xì)胞、原代細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、人類癌細(xì)胞、人類骨髓細(xì)胞、白血病細(xì)胞、人類胚肺成纖維細(xì)胞、人類腦神經(jīng)細(xì)胞和瘤細(xì)胞等細(xì)胞。

 

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去外泌體血清

(貨號(hào):C3801-0050/0100

 

外泌體由分泌性細(xì)胞分泌,存在于所有的生物體液中,包括血液、尿液、唾液、乳汁和腦脊液中。它們隨后被其他細(xì)胞吸收并發(fā)揮生物活性。

 

胎牛血清中含有大量的外泌體,但在外泌體研究中,如果仍然使用胎牛血清培養(yǎng)細(xì)胞,并通過(guò)收集上清液來(lái)提取外泌體進(jìn)行實(shí)驗(yàn),那么胎牛血清中本身的牛源外泌體將會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)分析造成極大的干擾。去外泌體血清是將由無(wú)菌采集的健康胎牛血清經(jīng)過(guò)過(guò)濾,去除≥99%的胎牛血清內(nèi)源外泌體,還可使細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)與未處理的胎牛血清具有相同的增殖速率和形態(tài)。

 

因此,去外泌體血清主要用于細(xì)胞體外的增殖培養(yǎng),收獲目標(biāo)細(xì)胞的外泌體。

 

去外泌體血清與處理前的胎牛血清具有相同的細(xì)胞生長(zhǎng)速率。適用于收集細(xì)胞分泌的外泌體時(shí)使用。
 

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低IgG血清

(貨號(hào):C2730-0100/0500)

 

IgG是胎牛血清中發(fā)現(xiàn)的最常見(jiàn)的抗體,低IgG血清主要通過(guò)A-Sepharose處理,使血清能夠保留原有的生物活性,同時(shí)降低血清的IgG含量,低于5μg/ml。低IgG胎牛血清適用于培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞。

 

因此,低IgG胎牛血清有利于單克隆抗體的純化,用于研究抗體和病毒反應(yīng)、細(xì)胞表面抗原表位。
 

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四環(huán)素血清

(貨號(hào):C2720-0100/0500)

 

普通胎牛血清中一般會(huì)含有四環(huán)素(Tet),當(dāng)使用非常敏感的Tet-誘導(dǎo)的基因表達(dá)系統(tǒng)時(shí),研究人員往往會(huì)遇到非預(yù)期的基因表達(dá)的問(wèn)題,為了確保精確地基因表達(dá),建議使用四環(huán)素調(diào)控系統(tǒng)胎牛血清,應(yīng)用于使用敏感四環(huán)素誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)(Tet-on, Tet-off),以及其它對(duì)四環(huán)素敏感的實(shí)驗(yàn)中。

 

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去脂胎牛血清

(貨號(hào):C3840-0050/0100/0500/0050X10)

 

去脂胎牛血清通過(guò)固體基質(zhì)脫脂作用去除內(nèi)源性脂類、甘油三酯和膽固醇,含量?jī)H為標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清的1/3。

 

去脂胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中用量較多,其含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成分,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。

 

  • 提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。

  • 提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。

  • 有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱源質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。

  • 是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基上所需因子來(lái)源。

  • 起酸堿緩沖液作用。

  • 提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。

 

去脂胎牛血清可用于蛋白激酶CK2-α’與腺樣囊性癌肺轉(zhuǎn)移相關(guān)性研究:

 

  • 蛋白激酶是酶類這個(gè)家族中最龐大的一員,被用來(lái)完成蛋白磷酸化作用的催化,這是控制細(xì)胞生命活動(dòng)中最通常的機(jī)制。其中最具有效性的蛋白激酶之一可能就是CK2。蛋白激酶CK2(protein kinase CK2, PKCK2),過(guò)去曾經(jīng)被稱為酪蛋白激酶-2或Ⅱ(cascin kinase2 or Ⅱ)。它是由兩個(gè)催化亞基(aa’)和兩個(gè)調(diào)節(jié)亞基(ββ)構(gòu)成的不均一四聚體。

  • 蛋白激酶CK2是由兩個(gè)分別為42—44KDa和38KDa的aa’ββ型異四聚體結(jié)構(gòu)。該結(jié)構(gòu)很穩(wěn)定,在體外只有在變性的條件下才能被解離。除了細(xì)胞基質(zhì),一些病毒蛋白也被CK2所磷酸化。蛋白激酶CK2在轉(zhuǎn)錄、信號(hào)、增殖,并且在導(dǎo)致腫瘤發(fā)生的各細(xì)胞步驟中發(fā)揮作用。

 

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IR(輻照)血清

 

輻照型血清是將正常血清經(jīng)過(guò)三次無(wú)菌過(guò)濾后再用鈷-60輻射滅菌制得的血清。輻照血清是細(xì)胞培養(yǎng)中最重要的天然培養(yǎng)基,它具有促進(jìn)細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞分化等的生物學(xué)功能其質(zhì)量的好壞直接影響著生物制品的安全性。

 

功能:

  1. 提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。

  2. 提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。

  3. 是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。

  4. 起酸堿度緩沖液作用。

  5. 提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。應(yīng)用適用于正常封閉與增殖旺盛的常規(guī)細(xì)胞系的培養(yǎng)等。

 

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HI(熱滅活)處理血清

 

加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。啟動(dòng)的補(bǔ)體系統(tǒng)參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,啟動(dòng)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞活化。在免疫學(xué)研究中,培養(yǎng)ES細(xì)胞、昆蟲(chóng)細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅活血清。

 

實(shí)驗(yàn)顯示,熱滅活血清對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是非必需的,對(duì)于非必須的細(xì)胞來(lái)說(shuō)血清滅活對(duì)于細(xì)胞生長(zhǎng)可能造成生長(zhǎng)速率降低,沉淀物還會(huì)顯著增多,不利于細(xì)胞觀察。因此,若非必須,不需要對(duì)血清進(jìn)行滅活處理。

 

如若需要使用熱滅活血清,可通過(guò)提高血清溫度到56℃,并且保持該溫度30分鐘完成。建議加放空白對(duì)照(同體積水)使用溫度計(jì)測(cè)溫,以測(cè)得溫度為56℃時(shí)為計(jì)時(shí)起始點(diǎn),加熱中可不時(shí)輕度旋轉(zhuǎn)混勻血清。

 

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胚胎干細(xì)胞(ES)專用血清

(貨號(hào):C04002-050/100/500)

 

是從多個(gè)批次的胎牛血清篩選出特定批號(hào)的血清,適用于人及小鼠胚胎干細(xì)胞、成體干細(xì)胞及原代細(xì)胞長(zhǎng)期培養(yǎng)的血清。

 

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間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)專用血清

(貨號(hào):C04400-050/100/500)

 

從多個(gè)批次的胎牛血清篩選出特定批號(hào)的血清,經(jīng)過(guò)骨髓,脂肪組織及臍帶來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞活性嚴(yán)格測(cè)試,通過(guò)傳代及分化比例測(cè)試。

 

 

其他動(dòng)物血清

 

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馬血清

(貨號(hào):C2510-0100/0500/1000)

 

10%馬血清可代替FBS用于支持SRBC的體外抗體應(yīng)答, 常與牛血清結(jié)合或單獨(dú)作為哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的補(bǔ)充培養(yǎng)基。

 

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豬血清

(貨號(hào):C2500-0100/0500/1000)

 

豬血清在染色體研究中表現(xiàn)非常出色,可用于淋巴細(xì)胞培養(yǎng),疫苗生產(chǎn)(生產(chǎn)支原體)中和脂質(zhì)體包裹的腺相關(guān)病毒(AAV),用于誘導(dǎo)大鼠肝纖維化,作為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)中的標(biāo)準(zhǔn)陰性參考。

 

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兔血清

(貨號(hào):C2520-0100/0500)

 

正常兔血清可作為免疫分析的阻斷劑和對(duì)照。在免疫組織化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)方面,各種研究均采用20%或1:200稀釋兔血清作為阻斷劑。

 

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羊血清

(貨號(hào):C2530-0010/0100/0500)

 

  • 用于生物醫(yī)學(xué)研究的大多數(shù)細(xì)胞系和原代培養(yǎng)物上,F(xiàn)BS的合適替代物,病毒分離和鑒定,病毒學(xué)研究。

  • 用作魚(yú)類細(xì)胞培養(yǎng)的有效NBCS替代物。

  • 可成功地代替胎牛血清在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中長(zhǎng)期用于環(huán)孢蘑菇的體外繁殖。

 

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雞血清

(貨號(hào):C2550-0100/0500)

 

適用于單抗研制、規(guī);囵B(yǎng)的疫苗生產(chǎn)、生物醫(yī)學(xué)研究和診斷試劑生產(chǎn)。

 

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驢血清

(貨號(hào):C2540-0010/0100/0500)

 

適用于單抗研制、免疫組化、規(guī);囵B(yǎng)的疫苗生產(chǎn)、生物醫(yī)學(xué)研究和診斷試劑生產(chǎn)。


 

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