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常用細胞培養(yǎng)包被試劑種類和使用方法及注意事項

瀏覽次數(shù):150 發(fā)布日期:2025-3-24  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負
什么是包被細胞培養(yǎng)瓶試劑?
 

包被試劑是一種用于處理培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿表面的化學(xué)物質(zhì),能夠模擬細胞在體內(nèi)的生長環(huán)境,促進細胞的附著、鋪展和增殖。通過包被處理,培養(yǎng)表面可以更好地支持細胞的生長和功能表達。
 
本文將為您詳細介紹幾種常用的包被試劑及其特點,并分享包被操作的注意事項,助您輕松提升細胞培養(yǎng)效果!


常見的包被試劑種類和使用方法

01明膠(Gelatin)CSP132

常用于包被細胞培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿,以促進細胞的貼壁和增殖,具有良好的生物相容性和細胞黏附性。

適用細胞:胚胎干細胞、間充質(zhì)干細胞、內(nèi)皮細胞等。
特點:價格低廉,易于使用,能夠提供良好的細胞附著支持。
使用范圍:常用于包被細胞培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿,以促進細胞的貼壁和增殖,具有良好的生物相容性和細胞黏附性。
使用濃度:1-20mg/ml   即1mg/ml-20mg/ml
包被體積:通常以完全覆蓋培養(yǎng)瓶底部為準,通常為 T-25瓶2.5ml, T-75瓶7.5ml
包被條件:37°C 孵育≥2小時,或 4°C 過夜。
接種細胞:使用前吸除多余明膠溶液,pbs洗1-2次后可以接種細胞。

02多聚賴氨酸(PLL) CSP073

相對分子量為 70,000~300,000 的 PLL 可作為細胞培養(yǎng)的生長基質(zhì),能夠促進細胞粘附和貼壁,是細胞培養(yǎng)中常用的細胞粘附劑。

適用細胞:神經(jīng)元細胞、原代細胞、懸浮細胞等。
特點:通過靜電作用增強細胞附著,適合難以貼壁的細胞。
常用濃度:0.01% 至 0.1% (w/v),即 0.1mg/ml 至 1mg/ml。
包被條件:37°C 孵育≥2小時,或 4°C 過夜。通常以完全覆蓋培養(yǎng)瓶底部為準,使用前吸除多余溶液,用無菌 PBS 沖洗 1-2 次。
 
 

03重組人纖連蛋白(FN)CSP044

是一種重要的細胞外基質(zhì)蛋白,具有多種生物學(xué)功能。它是一種高分子量的糖蛋白,能夠與細胞表面和細胞外基質(zhì)中的多種組分結(jié)合,如膠原蛋白、纖維蛋白、肝素、DNA和肌動蛋白等。

適用細胞干細胞、間充質(zhì)干細胞、內(nèi)皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞、成纖維細胞。
特點:作為細胞培養(yǎng)基質(zhì),提高細胞貼壁率,增強細胞代謝水平,縮短細胞生長時間。
常用濃度:1µg/cm² 至 10µg/cm²。
包被條件:37°C 孵育≥2小時,或 4°C 過夜。
包被體積: 如下列表
 
 
 
04 鼠尾膠原蛋白Ⅰ型包被液(1mg/mL)CSP145
 

鼠尾膠原蛋白是膠原蛋白的一種,主要為Ⅰ型膠原蛋白,廣泛適用于內(nèi)皮細胞、肝細胞、肌肉細胞和多種其他細胞類型的培養(yǎng),能夠模擬細胞外基質(zhì)的環(huán)境。
 

適用細胞:上皮細胞、肝細胞、肌細胞。
特點:可以制備成一種清晰的凝膠,提供 3D 基質(zhì)或表面涂在組織培養(yǎng)板上,促進細胞貼壁和增殖。
常用濃度1-5ug/cm²包被體積。
包被體積:T-25瓶2.5ml去離子水+50ul ( 1MG/ML 鼠尾膠原蛋白Ⅰ ),隨后將培養(yǎng)瓶放置4度過夜,吸出鼠尾膠原蛋白Ⅰ溶液,pbs洗2-3次后可加入細胞。
 

 
包被注意事項
 

1. 無菌操作:所有操作應(yīng)在無菌條件下進行,避免污染。
2. 均勻覆蓋:確保包被試劑均勻分布在培養(yǎng)瓶底部,避免局部過厚或過薄。
3. 濃度優(yōu)化:根據(jù)細胞類型和實驗需求優(yōu)化包被試劑的濃度。
4. 孵育時間:根據(jù)試劑和實驗要求調(diào)整孵育時間,確保充分包被。
5. 儲存條件:包被后的培養(yǎng)瓶可短期儲存于 4°C,但建議盡快使用以保證最佳效果。
 
通過選擇合適的包被試劑并遵循正確的包被步驟,可以有效提高細胞貼附和生長,為后續(xù)實驗提供可靠的細胞模型。
來源:上海中喬新舟生物科技有限公司
聯(lián)系電話:021-56760351
E-mail:hufangqiong@zqxzbio.com

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