H輔酶ⅠNAD測試劑盒微量法實驗通用規(guī)則

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產(chǎn)品名稱	規(guī)格	檢測方法
H輔酶ⅠNAD測試劑盒微量法	100管/48樣	微量法

實驗通用規(guī)則:
1、將液體加到酶標(biāo)孔中時，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
2、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
3、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。
4、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
5、實驗時，要使底物避光保存。
6、洗板時，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更加。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
7、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定。
8、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
9、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時。
10、液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。

測定原理
分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NAD+和NADH，NADH通過PMS的遞氫作用，還原氧化型噻唑藍(lán)（MTT）為甲瓚，在570nm下檢測吸光值；而NAD+可被乙醇脫氫酶還原為NADH，進(jìn)一步采用MTT還原法檢測。

需自備的儀器和用品
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。