動(dòng)物基因組DNA快速提取試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

瀏覽次數(shù)：3496　發(fā)布日期：2011-10-11　來(lái)源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責(zé)任自負(fù)

動(dòng)物基因組DNA 快速提�。�50 次）
概述：
本方法用于動(dòng)物組織基因DNA 的快速提取，可提取107-108 動(dòng)物細(xì)胞，其質(zhì)量能夠滿足
各種分子生物學(xué)要求。
組成：
1．溶液A 1ml RNase A 10mg/ml。-20℃保存
2．溶液B 55ml
3．溶液C 100ml×2 兩瓶，均為100ml
4．溶液D 3ml Resin 用時(shí)充分混勻
5. 溶液E 50ml 洗液(用前加入75ml 無(wú)水酒精,充分混勻)
6．溶液F 20ml TE buffer
步驟：
1．稱取100-300mg 動(dòng)物組織，液氮研磨成粉狀，將粉末移入1.5ml 離心管中，加入1ml
溶液B，振蕩混勻,室溫放置5min。
2． 12000rpm 離心5min。
3．將上清移入5ml 離心管中，加入2.5ml 溶液C，20μl 溶液A ,50μl 溶液D，充分混勻，
室溫放置20min。
4. ≥8000rpm 離心5min，棄上清。
5. 加入1ml 溶液C，充分混勻，≥8000rpm 離心1min，棄上清。
6．加入1ml 溶液E，充分混勻，≥8000rpm 離心1min，棄上清。
7．重復(fù)步驟6。
8. ≥12000rpm,離心1min，吸干上清，室溫晾干約5-10min，使乙醇揮發(fā)殆盡。
9. 取溶液F 200-300μl，混勻，40-50℃水浴5min。
10.≥12000rpm 離心1min，取上清液即為DNA。
注：1.組織若多，可適當(dāng)加大溶液B 和溶液D 的用量，其它成份不變。
2.混勻一定要溫和，否則DNA 大分子將被打斷使部分降解。
3.用戶可依實(shí)驗(yàn)需要，適當(dāng)調(diào)整溶液F 加入量，溶液F 越少，DNA 濃度越高，但產(chǎn)量略有損失，若
想最大限度提高產(chǎn)量，可重復(fù)步驟9、10。兩次所得DNA 可合在一處。

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