油類DNA 提取試劑盒（10 次，10ml 每次）使用說明書

油類DNA 提取試劑盒（10 次，10ml 每次）
簡述： 本試劑盒能從精練油提取痕量DNA，用于各種檢測目的。
適用范圍： 各種精煉油
提取時間： 40 分鐘至一小時，是目前國內(nèi)用時最短的試劑盒。
DNA 質(zhì)量： 樹脂法提取，能從大體積或微量體積油中提取高質(zhì)量DNA，因為精煉油過程中，DNA
破壞嚴重，因此所提DNA 并不是單一條帯DNA 片段，DNA 片段大小分布在幾十bp 至
600bp 之間，1.2%Agarose 電泳后，紫外燈下可能看不到DNA,即使看得見也是一片。
試劑盒組成：
1．溶液A(去油buffer): 110ml 2. 溶液B(裂解buffer): 120ml
3. 溶液C(樹脂，resin): 550ul(用前請搖勻)
4. 溶液D(洗液buffer )：110ml 5. 溶液E(TE buffer): 1.5ml
操作方法：
方法一：
1. 取10ml 精煉油加10 ml 溶液A,5ml 溶液B ,搖勻，靜置，小心去除上層
2. 加入50ul 溶液C(用前請搖勻)，輕搖，靜置2 分鐘。
3. 8000rpm 離心5 分鐘（可常溫或4 度），小心棄上清，
4. 加入1ml 溶液B，充分混勻，轉移入1.5ml 離心管，8000rpm，離心2 分鐘，棄上凊。
5. 加入1 ml 溶液D，充分混勻，轉移入1.5ml 離心管，8000rpm，離心2 分鐘，棄上凊
6. 重復歩驟5
7. 8000rpm,再離心1 分鐘，吸干上清，室溫晾干約5-10 分鐘。
8. 加入溶液E 50-100ul, 混勻，50-60 度水浴2-5 分鐘，
9. 8000-12000 rpm 離心2 分鐘，取上清液即為DNA。
方法二：
1 取3ml 精煉油加3 ml 溶液A ,3ml 溶液B ,搖勻，靜置，小心去除上層
2 加入30ul 溶液C(用前請搖勻)，輕搖，靜置2 分鐘。
3 8000rpm 離心5 分鐘（可常溫或4 度），小心棄上清，
4 加入3OOul 溶液B，充分混勻，轉移入1.5ml 離心管，8000rpm，離心2 分鐘，棄上凊。
5 加入500 ul 溶液D，充分混勻，轉移入1.5ml 離心管，8000rpm，離心2 分鐘，棄上凊
6 重復歩驟5
7 8000rpm,再離心1 分鐘，吸干上清，室溫晾干約5-10 分鐘。
8 加入溶液E 30-50ul, 混勻，50-60 度水浴2-5 分鐘，
9 8000-12000 rpm 離心2 分鐘，取上清液即為DNA。
注：可用PCR 檢測DNA 質(zhì)量，方法一或方法二所提DNA 均只需3-8ul/反應即可。