實驗室細胞培養(yǎng)注意事項

實驗室細胞培養(yǎng)中的“5M1E”

“5M1E”代表什么？在細胞培養(yǎng)中有多重要？

• 人（Man）

• 機器（Machine）

• 材料（Material）

• 方法（Method）

• 測量（Measurement）

• 環(huán)境（Environment）

 

>   人（Man）

• 人是處于中心位置和主導地位，其它“機”、“料”、“法”、“環(huán)”、“測”要素離開“人”也無法運轉。

• 研究、生產、質量管理，以人為本，只有不斷提高人的質量，才能有序推進實驗結果、產品質量、組織質量、體系質量及其組合的實體質量的提高。

• 只有具備良好素質、專業(yè)技能過硬的研究人員去開展相關實驗研究，按照規(guī)定的程序完成研究、生產等過程，并在研究過程中減少對環(huán)境產生影響，整個實驗室或細胞房才會有良性的發(fā)展。

• 建立良好、高效的人員管理規(guī)章制度，人崗匹配，實驗室負責人、試劑耗材管理人、儀器設備監(jiān)督人、值日生等。積極做好“傳、幫、帶”。

• 定期開展工作匯報，制定實驗室緊急事件處理方案等。

人	腳	100-1000 個微生物/cm2
	頭皮	106個微生物/cm2
	額頭	105個微生物/cm2
	噴嚏	104 – 105個微生物
	唾液	107個微生物/mL
無菌服	6小時后	1 – 6個微生物/cm2
空氣	戶外	100 – 500個微生物/m3
	室內	500 – 2000個微生物/m3

  細胞房內，人是最大的“污染源”  

預防貼士：
進入細胞房正確的穿衣順序：

• 換專用鞋（拖鞋，定期清潔）
• 無塵手套（避免不潔的雙手經穿著時粘附于無塵衣上）
• 網帽/口罩（戴網帽時須確保頭發(fā)不可暴露于網帽外，之后戴口罩遮住口鼻）
• 無塵服（不要穿棉質衣服，容易脫落纖維）
• 鞋套

   

>   機器（Machine）

機器指實驗室中所存有的與各類實驗相關的儀器設備，可分類別管理，設置儀器管理負責人，做好使用、點檢、保養(yǎng)等工作。

使用

• 每個儀器設備建立規(guī)范的操作程序，并做好使用記錄；
• 細胞房內區(qū)域設置合理，定期清潔，比如生物安全柜、培養(yǎng)箱、顯微鏡、冰箱等要經常清潔。

點檢

• 按照規(guī)定程序對儀器進行狀態(tài)及性能的確認，及早發(fā)現異常；
• 儀器出現異常要及時上報，并做好警示提醒，防止進一步的破壞。

保養(yǎng)

• 精密儀器、使用頻率高的儀器需要按照既定時間與程序進行檢修、保養(yǎng)；
• 一旦細胞房發(fā)生微生物污染，使用消毒液清潔儀器表面，水盤、水浴鍋添加殺菌試劑。

 

>   材料（Material）

材料指實驗室中所有實驗相關的試劑、耗材、組織細胞、實驗動物等。按照產品說明進行分類正確儲存，并設置采購、倉庫管理人，購買正品，準確做好管理工作。

培養(yǎng)試劑

• 按照產品說明正確保存、使用；

• 開封后的試劑及時使用，部分產品避免反復凍融與質量下降；

• 污染的培養(yǎng)試劑經消毒后再處理，不要直接倒入水池。

耗材

• 購買細胞培養(yǎng)級別，正確儲存、使用；

• 重復使用的耗材要注意清潔、滅菌完全以及效果測試；

• 污染的耗材要及時清理出細胞房。

 

>   方法（Method）

方法指實驗室中涉及到細胞相關實驗所遵循的標準程序或方法。不管是新人或老練的人員，均需要按照程序/方法進行實驗研究，不斷優(yōu)化實驗室細胞培養(yǎng)SOP。

1. 掌握細胞培養(yǎng)基礎知識，熟悉實驗室基本流程

2. 觀摩、練習細胞培養(yǎng)操作，復蘇、傳代、觀察、凍存 ，準確做好實驗記錄

3. 自主設計試驗方案熟悉更多細胞相關實驗操作，實驗結果可重復

4. 準確操作各類細胞相關實驗，制定合乎實驗室相關SOP

 

>   測量（Measurement）

測量指實驗過程中保證實驗結果質量所涉及的試劑配制、溶液計量、儀器精密性與性能的測量。配置專門測量人員，保準公共試劑、公共儀器使用的準確度與精確性。

• 按照正確流程配制試劑，調節(jié)pH、滲透壓，過濾，高壓滅菌等；

• 公共試劑正確配制、保存、分裝使用；精密、使用頻率高儀器做好準確校準與計量，保證實驗準確性，做好記錄與數據分析；

• 定期對計量、校準的儀器進行保養(yǎng)、檢修，保證其它測量工作的有序開展。

 

>   環(huán)境（Environment）

環(huán)境指實驗室系統的整體環(huán)境與實驗操作環(huán)境以及不同實驗操作之間銜接的環(huán)節(jié)。環(huán)境是保證實驗結果質量可控的前提，環(huán)節(jié)是每個步驟、程序銜接的重要控制點。

整體環(huán)境

• 不同潔凈級別的細胞房，環(huán)境標準會不同，各個區(qū)域設置合理；

• 發(fā)生大規(guī)模污染，根據實際條件，進行全面消毒、清潔；

• 定期做好清潔工作，定期更換消毒液。

操作環(huán)境

• 生物安全柜/超凈臺等操作環(huán)境均要符合細胞培養(yǎng)的無菌環(huán)境；

• 發(fā)生污染時，實驗臺面、培養(yǎng)箱、離心機顯微鏡臺面等操作環(huán)境要準確消毒、清潔。

保存環(huán)境

• 確保試劑、耗材等材料的保存條件正確；

• 污染試劑發(fā)生泄漏時，及時清潔保存環(huán)境，避免交叉污染；

• 定期清理過期產品、長期不用產品等。

-  END  -

 

歡迎關注公眾號留言咨詢，給您最合適的解決方案~