培養(yǎng)基廢液抽吸是實(shí)驗(yàn)室中移除培養(yǎng)容器(如細(xì)胞培養(yǎng)皿、搖瓶、生物反應(yīng)器等)中廢棄培養(yǎng)基的過程,常用于細(xì)胞培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)或發(fā)酵實(shí)驗(yàn)后的廢液處理。具體操作時(shí)常用的儀器包括以下三種:
1.手動吸液器:如移液槍或電動移液器,因?yàn)槲毫渴芟抻跇岊^和吸液管的容量,僅適用于小規(guī);蛭⒘繌U液抽吸。
2.電動的真空抽吸泵:通過機(jī)械或物理方式從密閉容器中抽出氣體,形成負(fù)壓真空環(huán)境。在培養(yǎng)基廢液抽吸中,負(fù)壓用于將液體吸入收集容器,相比手動方式,能高效抽吸液體。
3.中央真空系統(tǒng):大型實(shí)驗(yàn)室常用,需連接管道和廢液收集裝置,一般需要在實(shí)驗(yàn)室建筑物設(shè)計(jì)階段就已經(jīng)準(zhǔn)備好相關(guān)方案,且建設(shè)成本高。
在上述幾種常用的培養(yǎng)基吸液設(shè)備中,由于電動的真空抽吸泵兼顧經(jīng)濟(jì)性、效率和購置便利度,所以目前使用最多,下面我們再來分析一套完整的用于培養(yǎng)基廢液抽吸的真空泵包括哪些組成部分:
●主機(jī)——培養(yǎng)基廢液抽吸泵的主機(jī)一般內(nèi)置了一臺無油負(fù)壓真空泵,通過真空泵的抽氣,將整個(gè)系統(tǒng)的集液瓶、管路等各部件中的空氣抽到一定的真空度,實(shí)現(xiàn)一定的負(fù)壓從而使需要抽取的培養(yǎng)基上清液被抽走。這里需要特別注意的是,由于是在潔凈室細(xì)胞房內(nèi)使用,所以其真空泵必須是無油插電即用的,不能使用循環(huán)水真空泵或者是旋片式油泵。此外真空泵的吸力和抽氣速率需要與吸液量和集液瓶的容量相匹配,否則會出現(xiàn)吸不動或者是抽速太慢的問題。如BSUD-S204P4A實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)基上清廢液真空抽吸系統(tǒng),不同于常見的塑料外殼吸液泵,采用全不銹鋼材質(zhì)制作機(jī)體外殼,可耐受紫外燈照射和75%酒精擦拭消毒滅菌,不銹鋼外殼內(nèi)部有一臺無油真空泵,為系統(tǒng)提供負(fù)壓吸引力。
●真空表和調(diào)節(jié)閥——真空表可以顯示主機(jī)內(nèi)負(fù)壓真空泵的真空度。在實(shí)際使用中,真空表的作用除了可以搭配調(diào)節(jié)閥一起使用來調(diào)整吸力和抽速外,還可以用其來判斷儀器的工作狀態(tài)、排除建議故障,是實(shí)用性很高的一項(xiàng)附件。由于廢液抽吸系統(tǒng)是由多個(gè)固件和附屬件組成的,出現(xiàn)不能正常吸液的問題時(shí),不能簡單歸結(jié)為是主機(jī)的故障,有可能是管路連接錯(cuò)誤、阻水保護(hù)器堵塞、廢液瓶蓋未蓋緊漏氣、吸頭未裝到位等等多種原因。通過真空表就可以逐段測試是哪一段真空度不足,就可以判斷出問題原因,及時(shí)處理。調(diào)節(jié)閥則可以根據(jù)實(shí)際需要來改變吸力和抽速,該調(diào)節(jié)功能可以確保吸液的同時(shí),又使得不會因?yàn)槲^強(qiáng)將細(xì)胞抽走。BV240A標(biāo)配了這兩項(xiàng)附件,能夠提升使用的便利性。
●真空泵管和吸液管——真空泵管是指連接真空泵抽氣口至集液瓶抽氣接口的這一段,而吸液管則是指連接集液瓶的吸液接口和吸頭適配器這一段。對于這兩種管子的要求都是相同, 能夠耐受負(fù)壓,抽吸時(shí)不會被吸癟,同時(shí)需要使用無粉塵、原料干凈的鉑金硫化硅膠管,以確保不會污染培養(yǎng)的細(xì)胞。此外真空泵管和吸液管長度都要符合使用要求,一般真空泵管不超過1米,過長會影響吸力和抽速,同時(shí)拖沓的管路反而會影響真空泵和集液瓶的連接。而吸液管的長度一般為2米,這是因?yàn)榇蟛糠值呐囵B(yǎng)基廢液抽吸裝置都會被擺放在超凈工作臺或生物安全柜的臺面下方,通過吸液管將吸頭適配器伸入臺面內(nèi)使用。
●真空集液瓶——用戶在具體選型時(shí),可以根據(jù)吸液量,使用頻率來選擇集液瓶的容量。但是需要注意的是不能根據(jù)單次吸液量來選擇容量,這是由于大部分客戶都不會再每次吸液后處理集液瓶,一般是瓶內(nèi)液位即將裝滿時(shí)集中處理廢液,并進(jìn)行滅菌。所以可以適當(dāng)購買容量較大的集液瓶。同時(shí)和家用的吸痰器(個(gè)人使用沒有無菌要求)或醫(yī)用吸液器(使用醫(yī)療專用的一次性吸液袋)相比,實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基廢液吸取泵的集液瓶需要進(jìn)行121度高溫高壓滅菌,此外由于非每次實(shí)驗(yàn)后滅菌,一般還會加入稀釋后的次氯酸鈉防止長菌,所以集液瓶的材質(zhì)需要耐受溶劑。有一些用戶也比較喜歡選擇雙廢液瓶的機(jī)型,如BV235雙廢液瓶實(shí)驗(yàn)室廢液吸取裝置,標(biāo)配2只容量1.5L的真空集液瓶,雙廢液瓶的配置能提供豐富的使用方法,更靈活便利,包括:2只同時(shí)收集廢液擴(kuò)展容量;1只收集廢液1只做緩沖瓶保護(hù);2人同時(shí)吸液互不影響;1只滅菌時(shí)另1只繼續(xù)使用。
●腳踏開關(guān)和手持控制器——如前所述,由于培養(yǎng)基廢液抽吸裝置都會被擺放在超凈工作臺或生物安全柜的臺面下方,通過吸液管將吸頭適配器伸入臺面內(nèi)使用,用戶在操作時(shí)還需要帶上手套,如果每次都將手移出臺面,去操作主機(jī)上的開關(guān),會造成污染,這就需要使用外控附件來進(jìn)行控制。BV240A就標(biāo)配包含了開關(guān)和手持控制器兩種外控附件。腳踏開關(guān)是使用腳踩的方式來控制主機(jī)的啟停,而手持控制器則是通過手握,用大拇指按壓上面的按鈕來控制液體的吸停。這兩種方式都能實(shí)現(xiàn)對液體吸停的控制,避免去使用主機(jī)上的開關(guān)來操控。對于需要控制采購預(yù)算的用戶來說,也可以選擇只帶有其中一種控制方式的機(jī)型。
●吸頭適配器套件組——吸頭適配器的一端連接吸液管,另一端可以連接各種規(guī)格的一次性tip槍頭。吸液時(shí)通過查收一次性槍頭的吸頭適配器來實(shí)現(xiàn)吸液。一般根據(jù)培養(yǎng)的器皿來選擇對應(yīng)的吸頭適配器,如果是培養(yǎng)皿可以使用單道短吸頭(BS-K-1EJ)、培養(yǎng)瓶由于較深需要使用能夠連接1000ul槍頭的單道長吸頭(BS-K-1)、而抽吸96孔培養(yǎng)板時(shí)就需要使用8道吸頭適配器(BS-K-8EJ)。
●防倒吸進(jìn)水保護(hù)套件組——在實(shí)際日常操作中,會由于各種意外情況或者其他原因,造成液體沒有吸入集液瓶內(nèi)保存,而被抽入真空泵內(nèi),真空泵作為帶有電子部件的機(jī)械設(shè)備,進(jìn)水也會產(chǎn)生故障。所以一款合格的培養(yǎng)基廢液抽吸產(chǎn)品都會配有防倒吸阻水套件來避免這種情況的方式。圣斯特品牌經(jīng)濟(jì)基礎(chǔ)型的廢液抽吸產(chǎn)品,如BV300E,也帶有三道式防倒吸保護(hù),包括浮球逆止閥、防倒吸阻水保護(hù)器和緩沖杯。浮球逆止閥的作用是當(dāng)廢液瓶即將裝滿時(shí)自動關(guān)閉抽氣口,防止大量液體溢出進(jìn)入真空泵管內(nèi);而防倒吸阻水保護(hù)器則是由疏水性材料制造,空氣可以通過但是液體不能通過,在正確連接和使用的情況下,可以100%阻擋倒吸。
具體使用時(shí),還需要注意如下事項(xiàng):
1.無菌操作:在生物安全柜或超凈工作臺內(nèi)操作,避免污染培養(yǎng)物或環(huán)境。吸液瓶、吸液管等部件使用前需高壓滅菌或使用一次性無菌產(chǎn)品。
2。避免交叉污染:不同樣本的廢液使用獨(dú)立吸頭,避免混用。及時(shí)處理廢液收集瓶,避免過滿導(dǎo)致倒吸。
3.安全處理廢液:需高壓滅菌或化學(xué)滅活后再按實(shí)驗(yàn)室規(guī)范丟棄。
4.設(shè)備維護(hù):定期清潔抽吸管道,防止殘留物堵塞或滋生微生物。真空泵的阻水保護(hù)濾器及時(shí)更換,避免廢液或氣溶膠進(jìn)入泵體。
5.吸液時(shí)的技巧:控制抽吸速度。避免液體飛濺或產(chǎn)生氣溶膠。吸液管口避免觸碰容器底部,防止吸入細(xì)胞或沉淀物。