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CellSens standard軟件主要功能操作說明

瀏覽次數(shù):15919 發(fā)布日期:2018-5-22  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

一、明場實時圖像調(diào)節(jié)及拍照保存

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1.打開cellSens軟件后,首先在攝像控制工具窗口中切換相機芯片為“彩色模式”,此時相機自動切換為彩色芯片進行明場圖像采圖;接下來點擊“實時觀察”對樣品進行預覽,隨后在攝像控制工具窗口中將曝光模式調(diào)節(jié)為“自動”,最后將曝光模式調(diào)節(jié)到“手動”,通過增加或減少曝光時間來獲得滿意的觀察效果;

 

2.如果明場圖像背景不夠干凈,可以在攝像控制工具窗口中執(zhí)行白平衡操作,點擊“白平衡”后框選預覽圖像中樣品之外的背景區(qū)域,即可執(zhí)行白平衡;

 

3.根據(jù)實驗需求,調(diào)節(jié)拍照的分辨率后點擊“拍照”即可完成對當前預覽圖像的及時拍照,對該圖像另存到指定文件夾,圖像默認保存格式為“TIF”格式。

 

二、熒光實時圖像調(diào)節(jié)及拍照保存

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1.打開軟件后,首先在攝像控制工具窗口中切換相機芯片為“灰度模式”,此時相機自動切換為黑白芯片進行熒光圖像采圖;接下來勾選高級熒光模式“SFL”;

 

2.隨后點擊“實時觀察”對熒光圖像進行預覽,并在軟件上方的工具欄中選擇合適的熒光觀測模式(如DAPI、FITC),將曝光模式調(diào)節(jié)為“自動”,根據(jù)熒光表達的強弱,可以將曝光模式切換到“自動”,通過增加曝光時間來使得熒光表達更亮,反之亦然;若調(diào)節(jié)曝光時間超過1s,可以適當調(diào)高“增益”值(默認是1,可以調(diào)節(jié)到2)來使得更短的曝光時間達到相同的熒光亮度;

 

*1、如果覺得熒光樣品的背景不夠干凈,可以執(zhí)行黑平衡操作,點擊“黑平衡”后框選預覽圖像中熒光樣品之外的背景區(qū)域,即可執(zhí)行黑平衡;

 

*2、根據(jù)實驗需求,調(diào)節(jié)拍照的分辨率后點擊“拍照”即可完成對當前預覽圖像的及時拍照,對該圖像另存到指定文件夾,圖像默認保存格式為“TIF”格式

 

 

多通道圖像:用黑白相機芯片+自定義熒光觀測模式所拍出的熒光圖像,該圖像在軟件中已默認添加并使用了相應通道的偽彩色,此時圖像模式為“多通道,16 位圖像”。

 

三、多通道熒光自動疊加(CS-ST+ MA)

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1. 將工具窗口切換至“流程管理”工具窗口;

2. 選定“自動處理”選項;

3. 單擊“多通道”按鈕按鈕將顯示為已點擊狀態(tài),此時該按鈕內(nèi)部的充實淺黃色的背景;

4. 單擊添加通道按鈕 ,上下文菜單隨即被打開;該上下文菜單中將列出所有當前軟件設置的觀測模式(DAPI、FITC、CY3、CY5等熒光觀測模式);

5. 選定首先要采集的色彩通道,例如藍色“FUW”,隨后單擊第一個色彩通道旁邊的小加號,激活當前藍色通道,并按軟件提示將濾色塊轉盤切換至1號位;

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6. 隨后將工具窗口切換至“攝像控制”工具窗口,點擊“實時觀察”對熒光樣品進行曝光時間及增益值進行調(diào)節(jié),達到一個最佳的觀察效果;然后切換至“流程管理”工具窗口,單擊讀取設置按鈕,將最佳觀察效果時的曝光時間及增益值讀取到當前所激活的熒光通道;

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7.后面可以重復操作第4-6步,添加想要與當前已激活通道(例:藍色通道)組合的其他熒光通道;

8.在流程管理工具窗口中,單擊開始按鈕隨后軟件中的提示依次切換不同的熒光濾色塊,每次切換相機都會自動拍一張熒光圖像,待指定多通道組合中的濾色塊轉盤切換完成后,軟件自動將不同通道下拍攝的多張熒光圖像進行熒光疊加,圖像窗口中將顯示所有通道的疊加熒光圖像;

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9.將多通道熒光圖像另存為指定文件夾,默認的文件保存格式為“TIF”格式,此為原圖保存;

10.如果需要將單個通道下的熒光圖像保存,點擊“平鋪”按鈕后,將鼠標放置在需要保存的單個熒光通道圖像上,鼠標右鍵點擊“抽取”,軟件會將該通道的熒光圖像單獨抽取出來;此時點擊“圖像”>“印入信息”>并選擇“”之后再對該熒光圖像進行保存,即可得到一張包含偽彩信息的熒光圖像,圖像格式建議為“TIF”格式。

 

四、標尺信息顯示及保存

如果要在軟件中上顯示并保存標尺信息,可在進行圖像預覽時點擊“視圖”>“標尺”,標尺就會在圖像上顯示出來;隨后點擊“拍照”,拍照完成后,再點擊“圖像”>“印入信息”>并選擇“”之后再對該圖像進行保存,標尺信息就會印在該圖像上。

 

五、手動大圖拼接(CS-ST+MPC)

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1. 將工具窗口切換至“流程管理”工具窗口;

2. 選定“手動處理”選項;

3.單擊“手動圖像拼接”按鈕,按鈕將顯示為已點擊狀態(tài),此時該按鈕內(nèi)部的充實淺黃色的背景;

4.請確定“自動對齊”按鈕顯示為已點擊狀態(tài)。該按鈕應該顯示為
;

5.在流程管理工具窗口中,單擊開始按鈕,軟件將切換到實時觀察模式,對樣品聚焦清楚后,可以移動載物臺使得從樣品的左上角出現(xiàn)在視野里;

6.接下里單擊某個箭頭按鈕可設置要將下一幅圖像排列在當前圖像的哪一側,當你點擊箭頭時,軟件會自動采集當前的樣品圖像出現(xiàn)出現(xiàn)在圖像窗口里,而該采集圖像右側會出現(xiàn)當前的實時圖像,通過移動載物臺使得實時圖像中樣品的右上角部分與采集好左上角的圖像重合;隨后點擊箭頭時,當前樣品左右兩部分重合好的圖像會被采集,隨后在該采集圖像下方會出現(xiàn)當前的實時圖像,通過移動載物臺使得實時圖像中樣品到右下角部分和采集好的圖像重合;依次反復,直至一個完整的樣品被完全拼出;

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7.將已拼接好的的圖像另存為指定文件夾,默認的文件保存格式為 “VSI”格式。

 

六、手動景深擴展(CS-ST+MPC)

1. 將工具窗口切換至“流程管理”工具窗口;

2. 選定“手動處理”選項;

3. 單擊“即時擴展景深”按鈕按鈕將顯示為已點擊狀態(tài),此時該按鈕內(nèi)部的充實淺黃色的背景;

4. 明場圖像做景深擴展時選擇透射(指數(shù)/二次函數(shù)),熒光圖像做景深擴展時選擇反射(指數(shù)/二次函數(shù));

5.在流程管理工具窗口中,單擊開始按鈕,此時圖像窗口下方右側畫面即為當前的樣品焦面的實時圖像,而圖像窗口下方左側畫面顯示即為當前焦面上的樣品信息,緩慢微調(diào)過程中,依次達到樣品不同的焦面,等使用微調(diào)機構從樣品的下焦面走到上焦面后,圖像窗口下方左側畫面里會把不同焦面上所有的樣品信息完全累積記錄;而在圖像窗口上方會自動生成一張把不同焦面樣品信息疊加后的圖片,隨后單擊停止按鈕,圖像窗口會生成一張疊加好全部清晰的圖片;點擊文件> 另存為命令保存新的圖像。保存圖像時,請始終使用TIF 或VSI 文件格式。

 

七、時間間隔拍照

1. 激活流程管理工具窗口;

2. 選定“自動處理”選項;

3. 單擊“縮時”按鈕按鈕將顯示為已點擊狀態(tài),此時該按鈕內(nèi)部的充實淺黃色的背景;

4. 指定完成采集所需的時間,如 10 秒。在錄制時間字段中輸入值“00000:00:10”(即 10 秒)。你可以在該字段中直接編輯每個數(shù)字。為此,只需在要編輯

的數(shù)字前單擊一下;

5. 選擇數(shù)據(jù)段右側的單選按鈕,以將采集時間指定為不再更改。鎖形圖標會自動出現(xiàn)在所選單選按鈕旁;

6. 指定您要采集的幀數(shù)。在周期數(shù)字段中輸入,例如 10,隨即會更新間隔字段。它表示兩個連續(xù)幀之間經(jīng)過的時間;

7. 在流程管理工具窗口中,單擊開始按鈕,隨即會立即開始采集時間序列;

8. 隨后啟動流程按鈕會變?yōu)闀和0粹o,單擊此按鈕將中斷采集流程;

· 停止按鈕將變?yōu)榧せ顮顟B(tài),單擊此按鈕將停止采集流程,到此時為止所采集的時間棧圖像將得到保留;

· 在圖像窗口左下部的狀態(tài)欄中將出現(xiàn)進度條,它會告訴你還需要采集多少幅圖像;

9. 當你在流程管理工具窗口中再次看見開始按鈕,同時進度條消失時,即表示采集已完成;將時間序列成像另存為指定文件夾,預設的文件保存格式為 “VSI”格式。

 

來源:上海普赫光電科技有限公司(銷售)
聯(lián)系電話:021-51602084
E-mail:he.li@pooher.com

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