免疫學(xué)服務(wù)：流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

1、檢測(cè)指標(biāo)：
DNA倍體分析、DNA含量分析、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡；細(xì)胞表面抗原分析：淋巴細(xì)胞免疫分型、白血病及淋巴瘤免疫分型、血小板相關(guān)抗體分析、PNH相關(guān)抗原檢測(cè)（CD55/CD59）、胞內(nèi)細(xì)胞因子檢測(cè)等。
2、樣本及來(lái)源：
1) 細(xì)胞數(shù)量達(dá)到檢測(cè)所需（細(xì)胞周期1x10⁶、細(xì)胞凋亡3x10⁶）,生長(zhǎng)良好，無(wú)污染，附有細(xì)胞生長(zhǎng)照片，注明實(shí)驗(yàn)檢測(cè)項(xiàng)目所需試劑盒；來(lái)源于人、小鼠、大鼠或其它。
2) 外周血：EDTA或肝素抗凝全血，5ml左右；來(lái)源于人、小鼠、大鼠或其它。
3）試劑：部分常用熒光探針，如PI等，我公司可免費(fèi)提供；特殊標(biāo)記物，如CD抗體等，用戶須另行購(gòu)買，我公司可以代購(gòu)；用戶所提供抗體應(yīng)可與樣本發(fā)生特異性識(shí)別反應(yīng)。
4）樣品包裝要求：細(xì)胞培養(yǎng)在培養(yǎng)瓶中或操作前樣本于合適的條件保存。
3、收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

檢測(cè)說(shuō)明：
1、用戶需要進(jìn)行流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)須提前預(yù)約，同時(shí)說(shuō)明實(shí)驗(yàn)?zāi)康�、方法等。最低收費(fèi)300元。
2、我公司在正式接受實(shí)驗(yàn)委托一周內(nèi)交付實(shí)驗(yàn)結(jié)果。所提供實(shí)驗(yàn)結(jié)果忠實(shí)于樣本的實(shí)際情況。
3、用戶須一次性全額預(yù)付實(shí)驗(yàn)費(fèi)。
4、由用戶提供的樣品或試劑所致的實(shí)驗(yàn)問(wèn)題由用戶負(fù)責(zé)。
5、請(qǐng)?jiān)诒碇姓f(shuō)明檢測(cè)具體要求，由于填寫(xiě)資料不詳所致任何問(wèn)題由用戶負(fù)責(zé)。
6、請(qǐng)?jiān)谒蜆拥耐瑫r(shí)提供樣本來(lái)源及處理方法等信息，樣品檢測(cè)后原則上本公司不負(fù)責(zé)保存。

                         附：流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品推薦制備方法
A. 直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體）：
(1)收集1×10⁶個(gè)細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
(2)用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞，800rpm離心5min。
(3)用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×10⁵個(gè)細(xì)胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測(cè)即可。
(4)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10,000.00個(gè)細(xì)胞。
B. 未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
(1)收集2×10⁶個(gè)細(xì)胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
(5)加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測(cè)。
(7)流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10,000.00個(gè)細(xì)胞。
C.細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
(1)待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
(2)用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存，至少固定18小時(shí)。
(3)調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。

實(shí)驗(yàn)具體收費(fèi)、標(biāo)本的收集、實(shí)驗(yàn)試劑的定購(gòu)等事宜，請(qǐng)聯(lián)系嘉美生物。
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