快速DNA克隆服務(wù)

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細(xì)菌的DNA克隆是把外源基因與克隆載體進(jìn)行體外連接，繼而轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞，篩選出含有目的基因重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化子，并將該轉(zhuǎn)化子大量擴(kuò)增提取重組質(zhì)粒的過(guò)程。

 

◇ PCR產(chǎn)物TA克隆
許多高溫DNA聚合酶，如Taq DNA聚合酶、Tth DNA聚合酶等擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物在3′-末端后都帶有一個(gè)突出的堿基A，這樣的PCR產(chǎn)物可以和3′-末端帶有一個(gè)突出堿基T的載體進(jìn)行克�。ㄈ鏿UM-T）。
◇ 目的基因亞克隆
將含有目的基因的質(zhì)粒采用限制性酶切的方法克隆至商品化的表達(dá)載體或改造后的特殊載體上。

 

1. 公司可以免費(fèi)提供TA克隆載體(如pUM-T，pUM-T simple等)及pUC19、pBluescript系列載體，除此以外的所有亞克隆載體請(qǐng)您自己提供。
2. TA克隆實(shí)驗(yàn)，客戶需提供未純化的PCR產(chǎn)物不少于1 μg。我們?cè)谑盏綐悠泛�，先進(jìn)行回收純化，然后再開(kāi)始克隆實(shí)驗(yàn)。
3. 目的基因亞克隆實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)?zhí)峁┖�有目的基因的質(zhì)粒及亞克隆載體質(zhì)粒(均不少于2 ug)，如果質(zhì)粒量少，我們需要額外收取轉(zhuǎn)化費(fèi)用。我們?cè)谑盏綐悠泛�，先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果與背景資料一致后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。

 

服務(wù)項(xiàng)目 實(shí)驗(yàn)周期 PCR產(chǎn)物上“A”處理 0.5個(gè)工作日                         PCR產(chǎn)物回收純化 0.5個(gè)工作日                         DNA片段TA克隆 2-5個(gè)工作日                         DNA片段亞克隆 4-7個(gè)工作日

注：
以上實(shí)驗(yàn)費(fèi)用及周期是針對(duì)DNA片段長(zhǎng)度小于2 kbp的情況制定的，若 DNA片段長(zhǎng)度超過(guò)2 kbp或克隆后需要進(jìn)行測(cè)序時(shí)，具體價(jià)格及實(shí)驗(yàn)周期請(qǐng)垂詢。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告(包括具體實(shí)驗(yàn)步驟、照片等)、測(cè)序彩色波形圖、序列堿基圖、克隆構(gòu)建的質(zhì)粒及含有該質(zhì)粒的菌株。

 

 

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