瓊脂培養(yǎng)基S（R2A 瓊脂）​復(fù)蘇操作流程

瓊脂培養(yǎng)基S（R2A 瓊脂）​復(fù)蘇操作流程:
 
1. 準(zhǔn)備工作，開水浴鍋，預(yù)熱試劑，超凈工作臺(tái)紫外照射 30min,找到對(duì)應(yīng)細(xì)胞在液氮罐中的位置
2. 紫外照射后風(fēng)機(jī)吹 10min 后，酒精擦拭臺(tái)面，放入試劑和離心管，取 15ml 離心管，加入 9ml 培養(yǎng)液
3. 在液氮罐中取出細(xì)胞，先擰松放液氮，再擰緊，將凍存管放入 PE 手套中，然后水浴融化后取出，1-2min
4. 將凍存管噴酒精后放入超凈臺(tái)內(nèi)，擦干管壁，用 1ml 頭將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到已加培養(yǎng)液的離心管中
5. 800-1000rpm 離心 5min,注意配平
6. 將離心好的細(xì)胞棄上清，加入 5ml 完全培養(yǎng)基重懸，用移液管吹打 8-10 次， 避免產(chǎn)生氣泡，將細(xì)胞懸液接種到 10cm 培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加 5ml 培養(yǎng)液
7. 混勻，十字法或者 8 字法
8. 將混好的細(xì)胞放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)