小鼠核因子κBelisa檢測(cè)試劑盒elisa試劑盒常見組成部分
瀏覽次數(shù):190 發(fā)布日期:2021-7-28
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小鼠核因子κBelisa檢測(cè)試劑盒elisa試劑盒常見組成部分:
1)小鼠核因子κBelisa檢測(cè)試劑盒酶和底物:在ELISA中zui常用的酶為HRP和ALP。
2)抗體:在ELISA中應(yīng)用的抗體可分為多克隆抗體(多抗)和單克隆抗體(單抗)。
3)抗原:在ELISA中應(yīng)用的抗原要求有較高的特異性、親和力和純度。主要有三類,即自然抗原、人工合成抗原和基因重組抗原。
4 人E選擇素(E-Selectin/CD62E)檢測(cè)試劑盒包被:將免疫活性物質(zhì)(抗原或抗體)結(jié)合于固相載體上的過程稱為包被。常用的材料有聚苯乙烯、硝酸纖維薄膜等;常用的方法有吸附法、化學(xué)交聯(lián)法及親和素-生物素間接包被法
5)固相載體:固相載體是ELISA中用以分離結(jié)合標(biāo)記物和游離標(biāo)記物的主要手段,應(yīng)與各種免疫活性物質(zhì)有良好的結(jié)合性能并且不改變其免疫活性。常用的固相載體有聚苯乙烯塑料和硝酸纖維素膜。
【實(shí)驗(yàn)用途】核因子κB(NF-Kb),是一種蛋白質(zhì)分子,其結(jié)構(gòu)為一種體內(nèi)的生物誘導(dǎo)分子(biological trigger),是在體內(nèi)許多疾病的生理作用上扮演了重要的角色,從癌癥到骨質(zhì)疏松癥,再到細(xì)菌感染,皆與之脫離不了關(guān)系,NF-kB發(fā)現(xiàn)與哺乳動(dòng)物的細(xì)胞,平時(shí)結(jié)合與另一分子--IkB,IkB使得NF-kB分子失去生物活性,當(dāng)一組啟動(dòng)信號(hào)啟動(dòng)NF-kB后,IkB脫離NF-kB,NF-kB恢復(fù)活性,進(jìn)入細(xì)胞核。NF-kB位于TLR下游信號(hào)通路的樞紐位置,當(dāng)細(xì)胞受到生物應(yīng)激刺激后激活NF-kB,活化的NF-kB進(jìn)入細(xì)胞核調(diào)節(jié)炎性細(xì)胞因子的表達(dá),啟動(dòng)針對(duì)病原微生物的固有免疫和獲得性免疫。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測(cè)相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)生物素(biNFκBin)標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)因子呈正相關(guān)。