賽業(yè)課堂：如何選擇PCR反應(yīng)體系

《鼠年說(shuō)鼠》系列文章，每周二更新，專(zhuān)門(mén)解答大小鼠鏟屎官們?cè)陴B(yǎng)鼠過(guò)程中經(jīng)常遇到的繁育與鑒定類(lèi)的問(wèn)題，同時(shí)向大家征集問(wèn)題，任何基因編輯鼠飼養(yǎng)繁殖或鑒定的困惑統(tǒng)統(tǒng)可以丟給小賽，小賽會(huì)給您回復(fù)或統(tǒng)一在后面的內(nèi)容為大家做出詳細(xì)的解答。

基因工程小鼠基因型PCR鑒定的基本原則是利用基因工程小鼠基因組與野生型小鼠基因組的序列差異，以小鼠基因組DNA為模板進(jìn)行PCR，并以凝膠電泳比對(duì)比不同基因型特異產(chǎn)物的大小，根據(jù)條帶大小來(lái)區(qū)分小鼠的不同基因型。今天我們就開(kāi)始第十一期的內(nèi)容吧——如何選擇PCR反應(yīng)體系～

2條引物擴(kuò)增小于1kb的片段體系

備注：如果需要3條引物，則以1:1:1的比例，ddH2O減少，總體積不變。

4條引物擴(kuò)增小于1kb的片段體系

LongAmp聚合酶的體系

短片段PCR 程序

備注：根據(jù)條帶大小來(lái)確定延伸時(shí)間（諾唯贊P112-01是60s/kb，P222是20s/kb）

LongAmp聚合酶的PCR程序