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【摘要】 目的 研究抑郁癥動物模型的評價方法及認知行為變化。方法 造模前后分別測量攝食量和體重,使用Y型電迷宮評價抑郁癥動物模型的認知, 強迫游泳試驗評價抗抑郁藥物作用后動物行為的變化。結果 造模前后動物的體重增加量,造模后的動物攝食量, 藥物干預后動物強迫游泳實驗中的靜止時間在兩組之間有顯著差異。結論 體重增加量, 攝食量,電迷宮實驗（北京眾實迪創(chuàng)科技發(fā)展有限責任公司）可以作為抑郁癥動物模型的評價方法。強迫游泳試驗可以評價抗抑郁藥物干預后動物行為的變化。慢性應激抑郁動物模型存在認知行為的變化。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1. 1 來源及飼養(yǎng) SD大鼠[河南省試驗動物中心提供, 許可證號SCXK(豫) 2005- 0001],體重200～250, 在實驗室適應性群養(yǎng)1周, 飼養(yǎng)期間通風良好,自然光照, 自由進食水。
1.1. 2 分組 分組前用Y型電迷宮（北京眾實迪創(chuàng)科技發(fā)展有限責任公司）評價大鼠學習能力, 將達到10次當中連續(xù)對9次而總刺激數(shù)超過60次的大鼠剔除, 第二天用Y型電迷宮評價大鼠記憶能力(記錄20次當中的錯誤次數(shù)) ,同時測大鼠體重并編號, 根據(jù)體重將20只大鼠隨機分2組( 1組造模,1組空白對照), 造模組大鼠單籠飼養(yǎng),空白組群養(yǎng)。
1.2 方法
1.2. 1 制作模型 采用慢性不可預見應激抑郁模型,根據(jù)文獻(Willner 1997) 將1小時行為限制,50℃溫熱環(huán)境刺激5分鐘, 4℃冰水游泳5分鐘等10種刺激安排在星期一至星期五( 每天兩種), 星期六, 星期天分別是24小時斷食, 24小時斷水。將以上刺激重復4周。
1. 2. 2 電迷宮評價 采用Y型電迷宮評價大鼠的認知功能變化,在造模開始前對大鼠進行1次測評( 環(huán)境安靜, 光線暗,刺激電壓50伏, 測評前老鼠放入電迷宮適應3分鐘,每次刺激完成后休息10秒再進行第2次) ,分2天進行,第1天測10次刺激中連續(xù)跑對9次而需要的總刺激數(shù),第2天(24小時后48小時內(nèi))測刺激20次當中跑錯誤的次數(shù)。在造模結束、藥物干預以后再測評2次,記錄測評結果。
1. 2. 3 稱體重和攝食量 分別在造模前后, 藥物干預后測量大鼠體重,在大鼠稱重后每只大鼠給予30克飼料, 第2天同一時刻稱剩下的飼料重量即動物24小時攝食量。
1. 2. 4 強迫游泳試驗 第2次電迷宮測評后, 將大鼠放入直徑30cm,高40cm,水深20cm,水溫30℃的塑料桶中適應性游泳15分鐘, 第2天藥物干預( 模型組: 氯丙米嗪針0.4ml 腹腔注射,空白組: 生理鹽水相同劑量腹腔注射) 半個小時后,開始進行游泳試驗,用秒表記錄5分鐘游泳中大鼠不動的時間。每兩天進行1次測試
3 討 論
目前為止,慢性應激抑郁動物模型的有效性得到了廣泛的認可, 但對于該模型評價方法和認知、行為變化的研究還存在不同的認識。許晶等研究發(fā)現(xiàn)該動物模型在整個造模期間都表現(xiàn)為體重減輕, 持續(xù)整個造模期,并在造模結束以后表現(xiàn)的更明顯。Forbes NF等研究發(fā)現(xiàn)慢性應激抑郁模型大鼠攝食量減少和快感缺失有關, 還和胃腸道是5羥色胺的靶器官有關。本研究用體重增加量,攝食量的變化來評價動物模型, 結果表現(xiàn)為:體重的零增長、小量增長、負增長, 攝食量減退。可以認為體重增加變慢,攝食量減低是該模型的特征性表現(xiàn)之一。藥物干預后模型組動物攝食量滯后于體重增長量的恢復, 而與對照組有差異。重型抑郁癥臨床上經(jīng)常表現(xiàn)為包括認知功能在內(nèi)的多種功能減退,模擬重癥抑郁癥的認知功能改變是評價抑郁動物模型的一個重要指標。國內(nèi)外許多學者用多種方法來評價慢性應激抑郁動物模型的認知功能。Song L 等通過莫里斯水迷宮的研究發(fā)現(xiàn)無論是習的性無助動物模型還是慢性應激動物模型都存在認知功能的損害。張子貴等研究用Y型電迷宮評價小鼠的學習和記憶有很好的效果。本研究發(fā)現(xiàn)造模前后動物的學習和記憶能力存在顯著不同,模型動物在實驗中表現(xiàn)呆滯, 對電刺激反應不靈敏, 學習能力減弱, 在第2天進行的記憶能力測試中,模型鼠仍然表現(xiàn)遲鈍,對電刺激的反應
錯誤數(shù)比正常狀態(tài)多,記憶能力下降,看來多種慢性應激改變了大鼠的認知能力,該模型具有良好的表面效度。藥物干預后動物的學習能力恢復但記憶能力沒有恢復, 原因可能在于氯丙咪嗪改善抑郁動物學習能力要強于改善記憶能力�？傮w來看,該方法用于評價慢性應激抑郁動物模型是實用的。強迫游泳實驗最初被設計為制作抑郁動物模型, 但經(jīng)過一些學者研究發(fā)現(xiàn)該實驗可以被用來評價抗抑郁藥物的效果,經(jīng)過多次改進后以現(xiàn)在的實驗模式穩(wěn)定下來。俞瑾研究認為氯丙咪嗪,電針都可以引起模型動物在強迫游泳實驗中不動時間的縮短,認為該實驗可以作為抗抑郁藥物療效的評價指標之一。Rygula R( 2006) 等研究了慢性社會應激抑郁動物模型, 抗抑郁藥物的使用能夠使模型動物在強迫游泳試驗中不動時間縮短。本研究發(fā)現(xiàn)模型組在藥物干預前的強迫游泳試驗中不動時間長于對照組,該模型存在明顯的行為學異常, 氯丙咪嗪可以引起模型動物在強迫游泳試驗中不動時間的縮短, 從而說明強迫游泳實驗能夠反應抗抑郁劑的治療效果,并能夠很好的反應抑郁模型大鼠的行為學改變。
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