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實(shí)驗(yàn)動(dòng)物保種服務(wù)
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物保種,精子凍存,胚胎凍存
服務(wù)類別:其他生物研發(fā)總訪問(wèn):1942
最后更新:2013-8-28半年訪問(wèn):26
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         隨著轉(zhuǎn)基因、基因敲除、基因?qū)、人源化和其他基因修飾?dòng)物的大量制作和使用,保存這些重要的動(dòng)物模型需要大量的人力、財(cái)力和空間投入。

  冷凍保存技術(shù)的出現(xiàn),為科學(xué)研究者提供了不必花費(fèi)昂貴代價(jià)維持動(dòng)物模型核心種群的方法。冷凍保存技術(shù)還有其他許多優(yōu)點(diǎn),如可以避免珍貴的動(dòng)物模型受到微生物污染;避免受到火災(zāi)、洪水和地震等自然災(zāi)害毀滅性的打擊;更重要的是對(duì)于某些品系,可以防止伴隨動(dòng)物代數(shù)增加出現(xiàn)的基因停止或改變表達(dá)的風(fēng)險(xiǎn)。與活動(dòng)物的國(guó)際運(yùn)輸相比,運(yùn)輸凍存的精子、胚胎或卵巢的成本和風(fēng)險(xiǎn)更低。
  目前,配子凍存以精子和胚胎為主,部分凍存卵巢,較少凍存卵子,因?yàn)槟壳奥炎咏鈨龊髲?fù)蘇效率還比較低。維通達(dá)通過(guò)凍存精子,胚胎或卵巢組織,可以確?蛻舴N質(zhì)資源的安全。一旦客戶需要使用凍存的種質(zhì)資源,最快可以4~6周獲得冷凍保存的動(dòng)物資源。
 
服務(wù)內(nèi)容和流程:
(1)精子凍存
  精子凍存在保種服務(wù)中廣泛應(yīng)用,其優(yōu)勢(shì)在于技術(shù)成熟,成本低,容易操作等特點(diǎn)。通過(guò)無(wú)菌手術(shù)分離可育雄鼠的附睪,在特定的溶液進(jìn)行精子的游離,采集邊緣活力最好的精子,并加入專用的冷凍保護(hù)液,通過(guò)麥管冷凍保存在液氮中。
建議客戶每個(gè)品系提供2~3只12周至4月齡的可育成年小鼠或大鼠,凍存10支麥管的精液。
 
(2)胚胎凍存
  胚胎凍存是最早的和最安全的保存實(shí)驗(yàn)動(dòng)物品系的方法。影響胚胎冷凍保存成功的三個(gè)重要方面包括:
  ①胚胎的數(shù)量;
  ②復(fù)蘇后存活胚胎的數(shù)量;
 、叟咛ヒ浦埠蟠婊畹某赡陝(dòng)物數(shù)量。
  
  維通達(dá)建議客戶每個(gè)品系凍存約200~300枚2cell胚胎,即8管胚胎放入液氮中保存,每管30枚胚胎。胚胎的來(lái)源,既可以通過(guò)超數(shù)排卵的方法,或者通過(guò)體外受精(IVF)的方法獲得。當(dāng)然,也可以與品系凈化結(jié)合起來(lái),這樣可以節(jié)約獲得足量數(shù)目胚胎的準(zhǔn)備成本。
 
該技術(shù)的流程包括:
  ①胚胎采集。Vitalstar建議凍存2-cell胚胎。
  ②胚胎清洗。我們采用國(guó)際胚胎移植協(xié)會(huì)的建議方案進(jìn)行清洗,目的是防止胚胎被微生物感染。
 、叟咛龃。采用玻璃化冷凍進(jìn)行,經(jīng)凍存液按照標(biāo)準(zhǔn)的程序處理后,投入液氮保存。
 、軓(fù)蘇驗(yàn)證。凍存一周后,我們?nèi)〕?支驗(yàn)證管的胚胎進(jìn)行復(fù)蘇,胚胎移植后檢驗(yàn)出生小鼠的存活情況,若存活率大于50%,表明胚胎冷凍保存成功。
  ⑤長(zhǎng)期保存。驗(yàn)證保存成功的品系,我們會(huì)放入專用的胚胎保存液氮罐中長(zhǎng)期保存。
 
(3)其他類型配子的凍存
  維通達(dá)也可以提供卵巢組織切片和卵母細(xì)胞的凍存服務(wù)。由于這些技術(shù)還處于研發(fā)階段,建議客戶無(wú)法采用精子冷凍和胚胎冷凍保存時(shí)嘗試使用。
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